转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次，室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板!转染24小时后进行正常换液，不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液。原代细胞、免疫细胞转染时，细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基。难转染细胞高效率转染案例图赏：高效率转染N2a/Neuro-2a小鼠神经瘤母细胞高效率转染NK细胞高效率转染THP-1悬浮细胞高效率转染人淋巴悬浮细胞ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格：品牌：美国ZetaLife货号：AD6000250.

　　理想细胞转染方法，应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术，是目前转染效率较高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势.但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。其它物理和化学介导的转染方法，则各有其特点。无论采用哪种转染技术，要获得较优的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化!影响转染效率的因素很多，从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态，到转染方法的操作细节，都需要考虑！

上海悬浮细胞转染试剂的转染效果比较好

　　注意事项：质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水，但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer。溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右，甚至会转染失败!质粒必须去除内毒素，内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性，会导致转染效率下降70%-80%左右，甚至导致转染失败（推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒）！复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释，只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合，如果进行了稀释会导致转染失.

　　ZetaLife品牌Advanced系列采用新型工业材料，不需要更换培养基；特点是不需要换液，无细胞毒性，转染效率高，适用细胞种类多，可转染质粒DNA、siRNA及小动物活体转染。ZetaLife转染试剂的优势：活体转染ZetaLife公司Advanced系列转染试剂是全球独一个可以做小动物活体转染的转染试剂；脂质体转染试剂进入动物体后会迅速被分解掉，在肺组织内累积，诱发强烈的抗炎反应，具有毒性，因此不能用于小动物活体转染;而ZetaLifeAdvanced系列转染试剂属于新型工业材料，进入小动物皮下，不会被分解掉，能够进入细胞中发挥作用!

　　Thermo品牌RNAiMAX采用阳离子脂质体，需要更换培养基；特点是专门用来转RNA，对于细胞系的转染效率一般，对干细胞和神经原代细胞转染效果差!Promega品牌FuGENE6采用脂质混合体、特定缓冲液，需要更换培养基；特点是本质还是脂质体；只能转DNA；含有微量动物源成分，适用细胞种类因此受限；转染前后需要更换培养基；亲塑性，转染效率会因使用PE管（塑料管）而大打折扣.Roche品牌FuGENEHD采用脂质混合体、特定缓冲液，需要更换培养基；特点是本质还是脂质体；只能转DNA；亲塑性，转染效率会因使用PE管（塑料管）而大打折扣！

　　siRNA转染后9小时荧光检测转染效率，48-72小时检测mRNA或蛋白表达。转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量各品牌转染试剂类型与ZetaLife转染试剂的差异比较：Thermo品牌Lipo2000采用阳离子脂质体，需要更换培养基；特点是毒性大；转染前后需要更换培养基；可以转染质粒DNA、siRNA（效果差）!Thermo品牌Lipo3000采用阳离子脂质体，需要更换培养基；特点是相比Lip2000毒性略小；转染前后需要更换培养基；可以转染质粒DNA、siRNA（效果较差）！