标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释！加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔!在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）！

白介素ELISA检测试剂盒说明书

　　小鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒检测范围：使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素-6（IL-6）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素-6（IL-6）水平。用纯化的小鼠白细胞介素-6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-6（IL-6），再与HRP标记的白细胞介素-6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻-底洗涤后加底物TMB显色！

　　TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的白细胞介素-6（IL-6）呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-6（IL-6）浓度!标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验.若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

　　5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染.6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用.保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃！2．有效期：6个月在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定!对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，Z好-70℃冻存备用.

　　10!终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）!1测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）！测定应在加终止液后15分钟以内进行！操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度.

　　加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干！加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外.温育：操作同3!洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟。