TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度!标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验.若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性!

　　 上海晅科生物科技有限公司是一家着力于研究生物诊断试剂的公司， 经过多年的坚持不懈与努力，公司在业内也算是有属于自己的一片天。 公司多年来一直坚持为客户提供专业、快捷、周到的服务，愿与业内同仁共同致力于行业的进步。 公司主营产品有:小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA检测试剂盒，我们在这里等待您的到来！

　　 上海晅科生物科技有限公司，位于上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室。公司主营生物诊断试剂行业，如何了解{推广产品}产品信息详情请拔打热线：13671826025华。

牛肿瘤坏死因子α

　　2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果！3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差!一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样！4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔.如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）！5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染!

　　5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染.6．底物请避光保存!7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准!8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理！9．本试剂不同批号组分不得混用.保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃!2．有效期：6个月生产企业：上海晅科生物科技有限公司小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA检测试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存.

　　加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外.温育：操作同3!洗涤：操作同5！显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟!10!终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）！1测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）.测定应在加终止液后15分钟以内进行！操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔！在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

　　使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平！用纯化的小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（TNF-α），再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色！