产品介绍PMA是一种高亲和性的DNA结合染料，该染料本身具有微弱的荧光，但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光！它尤其与双链DNA具有高亲和性。PMA不具有细胞膜渗透性，因此可选择性地修饰膜受损的死细胞的DNA.PMA修饰的DNA经蓝光（~464nm）光解后，PMA上的光反应性叠氮基转化为高反应性氮烯自由基，与DNA结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键，从而导致永，久性DNA修饰（图1）。

　　将样品曝光，可以使用蓝色或白色光源，照射时间需自行摸索。例如，可用60W的蓝光灯，照射15min.注：①若使用卤素灯，我们建议将PMA处理的样本管放在距离光源20cm处的冰块上。冰块应放在透明托盘中，调整光源使其直接指向样品，光解5-15min；②若直接用环境中获取的细菌进行实验，由于环境样本的复杂性或浑浊度，需适当延长光解时间.注意事项使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验！试剂盒组分中含有荧光染料，使用及保存过程中注意避光！

　　建议开始PMAqPCR活细菌检测前，先验证引物及PCR程序是否合适!死、活细菌对照dCt计算qPCR结束后，使用仪器软件计算每个样本的Ct值。通过计算每个对照细菌的dCt的方式，判断PMA是否成功抑制了死细菌DNA的扩增，计算如下：dCt活=Ct(活,PMA处理)-Ct(活,PMA未处理)dCt死=Ct(死,PMA处理)-Ct(死,PMA未处理)活细菌的dCt期望值接近于0±1，这表明PMA不会影响活细胞DNA的扩增；死细菌的dCt期望值大于4（dCt为4表示减少了约16倍，即去除了94%的死细菌DNA；dCt为8表示减少了约250倍，即去除了96%的死细菌DNA）！

　　该修饰过程会使DNA不溶，并使其在随后的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失，进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增！残留在溶液中未结合的PMA，在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物，使羟胺不再能够共价结合DNA，从而不影响PCR扩增！这个特性使得PMA可以通过实时定量PCR（qPCR）的手段，检测多种样本类型包括：细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞；与qPCR、NGS、Sanger测序和LAMP技术相结合，广泛应用在食品和水安全和环境测试中。

正宗叠氮溴化丙锭PMA标准液

　　为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作.死细菌的dCt取决于许多因素，包括：菌株系/细胞类型；细菌被杀死方式；PMA使用浓度；扩增序列长度!活细菌占比计算如果死、活细菌对照结果正常，可以进入样本中活细菌占比计算!计算样本的dCt值：转换dCt值为活细菌比例：计算活细菌的绝，对数量dCt样本=Ct(样本,PMA处理)-Ct(样本,PMA未处理)PMA抑制倍数=2（样本dCt）活细菌%=100/PMA抑制倍数如果想计算样本中活细菌的绝，对数量☆，需要用已知数量的目标菌的基因组DNA制作标准曲线!

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　　 关于PMA标准液，作为一家主营产品为PMA（叠氮溴化丙锭）标准液的厂家，上海晅科生物科技有限公司在生物诊断试剂这个行业中都享负盛名，在业界中也有一定的地位。

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