该修饰过程会使DNA不溶，并使其在随后的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失，进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增！残留在溶液中未结合的PMA，在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物，使羟胺不再能够共价结合DNA，从而不影响PCR扩增！这个特性使得PMA可以通过实时定量PCR（qPCR）的手段，检测多种样本类型包括：细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞；与qPCR、NGS、Sanger测序和LAMP技术相结合，广泛应用在食品和水安全和环境测试中!

正宗PMA标准液核酸染色

　　建议开始PMAqPCR活细菌检测前，先验证引物及PCR程序是否合适!死、活细菌对照dCt计算qPCR结束后，使用仪器软件计算每个样本的Ct值！通过计算每个对照细菌的dCt的方式，判断PMA是否成功抑制了死细菌DNA的扩增，计算如下：dCt活=Ct(活,PMA处理)-Ct(活,PMA未处理)dCt死=Ct(死,PMA处理)-Ct(死,PMA未处理)活细菌的dCt期望值接近于0±1，这表明PMA不会影响活细胞DNA的扩增；死细菌的dCt期望值大于4（dCt为4表示减少了约16倍，即去除了94%的死细菌DNA；dCt为8表示减少了约250倍，即去除了96%的死细菌DNA）!

　　一般来说，灯越亮，光解步骤的效率就越高.非LED灯（如卤素灯）可能会加热您的样本并对分析产生负面影响，照射时需要使用冰块对样品降温处理。样本可以在光解后冷冻保存！若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果.如需在检测之前冷冻样本，建议先进行预实验！PMA的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除PMA共价修饰的DNA；因此，在提取基因组DNA时，需使用相同体积的基因组DNA洗脱液，进行体积归一化处理.

　　 上海晅科生物科技有限公司，位于上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室。公司主营生物诊断试剂行业，如何了解{推广产品}产品信息详情请拔打热线：13671826025华。

　　试剂盒组分中含有荧光染料，使用及保存过程中注意避光。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作！DilinoleylDiI（细胞膜橙红色荧光探针）DiD（细胞膜红色荧光探针）DiR（细胞膜近红外荧光探针）CytoMBriteTM细胞膜红色荧光探针CellTrackerCM-DiI（细胞膜橙红色荧光探针）CellTrackerCM-DiI（细胞膜橙红色荧光探针）DiOPlus（细胞膜绿色荧光探针升级款）CytoMBriteTM细胞膜橙红色荧光探针Hoechst33258Hoechst33258染色液（即用型）Hoechst33342Hoechst33342染色液（即用型）DAPI（4,6-二脒基-2-苯，基吲哚二盐酸盐）DAPI染色液（即用型）PropidiumIodide（碘化丙锭，PI）EthidiumHomodimer-I（溴乙啡锭二聚体I，EthD-I）DRAQ5活细胞DNA染料DRAQ5活细胞DNA染料DRAQ5活细胞DNA染料DRAQ7死细胞DNA染料DRAQ7死细胞DNA染料DRAQ7死细胞DNA染料7-AADOxazoleyellow（恶唑黄）,1mMinDMSOCalceinAM（钙黄绿素AM）LuciferYellowCada，verine！

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　　注：①商用DNA提取试剂盒提取的DNA，qPCR模板以2μL作为起始优化体积；②模板体积不得超过最终反应体积的10%；③模板浓度：gDNA做模板时，通常1-10ng即可；④PCR引物的终浓度通常为0。4μM，可以得到较好的结果，反应性能较差时，可以在0。2-1μM范围内调整引物浓度。轻轻涡旋混匀反应混合液，转移固定体积至PCR管。测试程序（根据自备qPCRMix试剂盒程序进行程序设定）.数据分析使用活细菌和死细菌作为对照，分析计算样本中活细胞数。