注：①商用DNA提取试剂盒提取的DNA，qPCR模板以2μL作为起始优化体积；②模板体积不得超过最终反应体积的10%；③模板浓度：gDNA做模板时，通常1-10ng即可；④PCR引物的终浓度通常为0！4μM，可以得到较好的结果，反应性能较差时，可以在0。2-1μM范围内调整引物浓度！轻轻涡旋混匀反应混合液，转移固定体积至PCR管.测试程序（根据自备qPCRMix试剂盒程序进行程序设定）.数据分析使用活细菌和死细菌作为对照，分析计算样本中活细胞数。

　　YF555Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光）YF555Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光）YF555Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光）YF555Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（橙红色荧光）YF594Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（红色荧光）YF594Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（红色荧光）YF594Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（红色荧光）YF594Click-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（红色荧光）YF647AClick-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（远红荧光）YF647AClick-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（远红荧光）YF647AClick-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（远红荧光）YF647AClick-iTEdU通用款细胞增殖检测试剂盒（远红荧光）EDU（5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷）EDU（5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷）EDU（5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷）CFDASE细胞增殖与示踪检测试剂盒CFDASE细胞增殖与示踪检测试剂盒DiO（细胞膜绿色荧光探针）DiA（细胞膜绿色荧光探针）DiI（细胞膜橙红色荧光探针）产品说明书PMA（叠氮溴化丙锭）,20mMinwater产品货号：XK4051产品规格：100μL产品参数外观：橙红色液体Ex(pH3)=464nm(beforephotolysis)Ex/Em(afterphotocrosslinkingtonucleicacid)=510/610nm分子式：C27H32Cl2N6分子量：515储存条件-20℃避光保存，有效期见外包装！

PMA标准液-20度保存

　　一般来说，灯越亮，光解步骤的效率就越高！非LED灯（如卤素灯）可能会加热您的样本并对分析产生负面影响，照射时需要使用冰块对样品降温处理.样本可以在光解后冷冻保存!若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果.如需在检测之前冷冻样本，建议先进行预实验！PMA的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除PMA共价修饰的DNA；因此，在提取基因组DNA时，需使用相同体积的基因组DNA洗脱液，进行体积归一化处理。

正宗PMA标准液-20度保存

　　将样品曝光，可以使用蓝色或白色光源，照射时间需自行摸索。例如，可用60W的蓝光灯，照射15min!注：①若使用卤素灯，我们建议将PMA处理的样本管放在距离光源20cm处的冰块上！冰块应放在透明托盘中，调整光源使其直接指向样品，光解5-15min；②若直接用环境中获取的细菌进行实验，由于环境样本的复杂性或浑浊度，需适当延长光解时间！注意事项使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验.试剂盒组分中含有荧光染料，使用及保存过程中注意避光。

　　 上海晅科生物科技有限公司，具体产品品牌可上我司网站上查询！质量保证 价格取胜 信誉地址：上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室 我们将尽全力为您提供优惠的价格及快捷细致的服务，希望能对您的工作有所帮助！更多产品详情请联系：华 13671826025。

　　该修饰过程会使DNA不溶，并使其在随后的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失，进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增!残留在溶液中未结合的PMA，在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物，使羟胺不再能够共价结合DNA，从而不影响PCR扩增。这个特性使得PMA可以通过实时定量PCR（qPCR）的手段，检测多种样本类型包括：细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞；与qPCR、NGS、Sanger测序和LAMP技术相结合，广泛应用在食品和水安全和环境测试中.

　　产品介绍PMA是一种高亲和性的DNA结合染料，该染料本身具有微弱的荧光，但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。它尤其与双链DNA具有高亲和性!PMA不具有细胞膜渗透性，因此可选择性地修饰膜受损的死细胞的DNA.PMA修饰的DNA经蓝光（~464nm）光解后，PMA上的光反应性叠氮基转化为高反应性氮烯自由基，与DNA结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键，从而导致永，久性DNA修饰（图1）。

　　阳性对照可以使用活细胞的基因组DNA!为了验证PMA在测试样本中的有效性，可对比同处理样本-/+PMA之间的Ct(dCt)变化！实验材料（自备）光源（用于PMA修饰DNA后的光解步骤）细菌基因组DNA提取试剂盒配套的qPCRMix试剂盒对应样本类型的有效qPCR引物实验步骤吸取10μL菌液于液体LB培养基，在细菌培养箱中培养过夜或更长时间，使细菌培养至对数生长期（OD600≈0)；注：培养基类型及培养时间根据实验调整！