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- 更新日期:2021-07-21
果的准确性和重现性.SPE可以大大减少食品、环境样品和生物样本等复杂基体中潜在干扰物的种类和数量,提高分析和定性定量分析的准确性;在色谱分析中,样品的净化还可延长色谱柱的使用寿命;SPE固相萃取柱制样对目标分析物的富集浓缩功能,则可大幅提高分析方法的检测灵敏度,使一些重要的痕量分析称为可能.SPE固相萃取柱基本方法SPE实质上是一种液相色谱分离,所用的吸附剂也与液相色谱固定相相同,只是在粒度上有所区别。
Diol二醇基固相萃取柱可作为正相或反相柱,萃取极性化合物二醇基填料具有类似硅胶的保留性能和较小的酸性,碳链提供了额外的疏水作用,因而可作为正相或反相吸剂!若使用硅胶柱,硅胶的酸性导致碱性杂质保留,可以换用Diol柱!特点:可替代硅胶柱并避免碱性杂质干扰通过溶剂配比实现正相或反相保留参数:碳含量:5%平均粒径:40-75μm平均孔径:100Å应用:分析植物油中的色素、酚类、磷脂组成检测尿液等生物基质中的药物及代谢物分离纯化聚糖混合物订货号EB170122300100mg1ml100根/盒订货号EB170122400200mg3ml50根/盒订货号EB170122500250mg3ml50根/盒订货号EB170122600500mg3ml50根/盒订货号EB170122700250mg6ml30根/盒订货号EB170122800500mg6ml30根/盒订货号EB1701229001000mg6ml30根/盒订货号EB1701231001000mg12ml20根/盒订货号EB1701232002000mg12ml20根/盒C8在吸附性上与C18键合相类似,主要靠非极性碳键相互作用!
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SPE的一般做法是:利用选择性吸附于选择性洗脱的色谱分析原理,使液体样品通过吸附剂,保留其中的分析物,用适当强度溶剂洗除杂质,然后用少量溶剂洗脱分析物,达到快速分离净化与浓缩的目的.也有选择性吸附干扰杂质,而让分析物洗除,或同时吸附杂质和分析物,在使用合适的溶剂选择性洗脱分析物的做法!三种常见固相萃取柱的操作方法介绍:反相萃取柱操作从极性基体中提取非极性的样品活化:以3—5毫升甲醇淋洗萃取柱;以3—5毫升去离子水(或缓冲液)淋洗萃取柱并保持萃取柱湿润上样:以合适的流速使样品均匀通过萃取柱清洗:以5毫升适当极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱(常用的有纯水,缓冲液,水/有机溶剂混合液)洗脱:将被测样品,用1—5毫升非极性溶剂分批洗脱至收集容器正相萃取柱操作从非极性基体中提取极性的样品活化:3—5毫升非极性溶剂淋洗萃取柱清洗:以5毫升适当非极性的溶剂洗脱吸附样品的萃取柱洗脱:将被测样品,用1—5毫升极性溶剂分批洗脱至收集容器离子交换萃取柱提取带电荷的样品活化:以3—5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱上样:以较低的流速,使样品均匀通过萃取柱清洗:5毫升去离子水/或低离子强度的缓冲液淋洗萃取柱洗脱:将被测样品,用1—5毫升高离子强度的缓冲液洗脱至收集容器固相萃取柱的选择1:石墨化炭及复合SPE系列,固相萃取柱2:聚合物基质SPE系列(HLB-MCX-MAX-WCX-WAX)固相萃取柱3:硅胶基质正相SPE系列(硅胶-氟硅土-氧化铝-Diol-PSA-氨基)固相萃取柱4:硅胶基质离子交换SPE系列(SAX-SCX-PRS)固相萃取柱5:硅胶基质反相SPE系列(C18-C8-CN)固相萃取柱6:前处理及分析应用(固相萃取)固相萃取柱7:C8-SCX-SAX混合SPE系列(药物代谢及滥用)固相萃取柱!
举例来说,一个3ml500mg的C18小柱,如果加甲醇活化,其甲醇全部流至筛板时间约为20分钟,而在过样品液时,25ml的液体2小时可以流完,而且用重力法如果得当,工作速率不一定比吸力法差很多.因为我们可以充分利用空闲时间,用吸力法必须有人在旁边守候,而重力法由于不需要用电,可以充分利用午休和晚上时间过柱,液体量大时接个堆叠接头和延长管即可,安排好实验步骤,工作效率一样很高!另外,重力法不需要抽气机和固相萃取器.
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尽量少在固相萃取条件选择上,有人为了提高提取效率,尽量多加液体,或选择填料量大的小柱,我觉得大可不必如此.尤其在用重力法时,由于效率高,很多情况下是柱头吸附,并不是所有的填料都在起作用,填料多了不仅液体流出速度会更慢,而且在洗脱时的扩散会很明显!因此建议,够用就行,在能保证效率时,填料尽量少,加液也不宜多。实验条件不宜过分细化固相萃取从原理上是色谱分离,但是在操作时它作为吸附萃取剂使用,由于填料性质、松紧常有差异,因此在实际实验中不必因为追求效果而设计出很复杂的洗脱程序.
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