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- 更新日期:2021-07-27
Flash柱正向Flash柱介绍基质上修饰的基团极性大于流动相的极性的色谱模式称之为正相色谱,依靠样品极性不同在固定相和流动相产生分配的作用达到分离的目的.这种分离模式下,样品按照极性从弱到强依次从纯化柱上被洗脱下来!常用正相固定相包括:未修饰的硅胶;二醇基、氨基、氰基等硅胶基质固定相;氧化铝等.正相硅胶固定相主要应用在合成非极性或中等极性中间体等的初步纯化,常规的流动体系为正己烷/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇等。
氧化铝固定相分为酸性、中性、碱性三种。酸性氧化铝一般利用酸性溶剂进行预处理,具有微弱阳离子特性,表面更易保留中性和带负电荷的物质,不能很好地保留带正电荷的物质,主要应用在酸性色素、醛类、酸类化合物的分离纯化!碱性氧化铝通常利用碱性溶液进行预处理,具有阴离子特性并有阳离子交换功能,对极性阳离子样品具有强吸附作用,主要应用于碱性色素、生物碱等碱性物质的分离纯化!而中性氧化铝对样品的酸碱性不敏感,主要应用于苷、醛类和酯类等酸碱不稳定化合物.
Flash柱的常规规格•Flash常使用的填料是硅胶(规格多为40-63m60Å),原因是:-在当时用于色谱柱和TLC的填料选择有限;-其他键和相如C8,C18等过于昂贵.因此大部分文献可查的Flash应用方法都是以硅胶为分离基质而开发出的方法。•Flash基本就是正相液相色谱分离技术。也有使用反相硅胶填料的;但多数用户倾向于Flash技术使用硅胶已足够!•通常上样规模为毫克级-百克级。流速为10mL/min到300mL/min!
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但相比较硅胶等无机基质来说,有机基质固定相能耐受的分离机械强度较低,分离纯化效果较差,限制了其在纯化方面应用范围!复合基质是兼容、中和了无机基质和有机基质的优缺点,但一般复合基质相应的固定相都是价格昂贵,所以在制备纯化方面应用较少!修饰/键合相通过对基质进行修饰或者键合不同的基团,形成了不同分离类型的固定相,通常包括:正相、反相、离子交换、SEC、手性等等固定相!基质上修饰的基团极性大于流动相的极性的色谱模式称之为正相色谱,依靠样品极性不同在固定相和流动相产生分配的作用达到分离的目的!
这种分离模式下,样品按照极性从弱到强依次从纯化柱上被洗脱下来.常用正相固定相包括:未修饰的硅胶;二醇基、氨基、氰基等硅胶基质固定相;氧化铝等!正相硅胶固定相主要应用在合成非极性或中等极性中间体等的初步纯化,常规的流动体系为正己烷/乙酸乙酯、二氯甲烷/甲醇等!其优点是纯化简单、样品后处理简单;缺点是分离性能不高(与反相固定相比较),重现性较差,且吸附性较强甚至对某类物质产生不可逆吸附.此外,一些极性基团(二醇基、氨基、氰基等)键合的正相固定相经常应用在反相条件下,对于在C18等反相固定相保留不强的极性化合物,可以获得很好的分离纯化效果!
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