当样品物质轻轻地铺在密度梯度介质的液面上，起动离心机，在离心力的作用下，一定时间后便形成不同物质的区带！当继续离心时每个区带会逐一达到管底，所以，在沉降zui快的区带到达管底之前要停止离心，并将每个区带分部收集。zui常用的制备密度梯度的化合物有蔗糖、甘you、氯化铯和硫酸铯等.离心技术介绍将样品放入离心机转头的离心管内，离心机驱动时，样品液就随离心管做匀速圆周运动，于是就产生了一向外的离心力！由于不同颗粒的质量、密度、大小及形状等彼此各不相同，在同一固定大小的离心场中沉降速度也就不相同，由此便可以得到相互间的分离.

　　储备液一般使用两种密度的蔗糖溶液或两种密度的氯化铯溶液来制备!样品一般铺在溶液的表面，然后开始离心!在实验方法上也可以采用平衡密度梯度法，在这种离心法中，介质的梯度不是预先配制，而是在离心过程中，由于离心力的作用而逐渐形成.样品物质和氯化铯的浓盐溶液充分混合均匀，离心开始之后，铯盐由于离心力的作用，自离心管口至离心管底形成连续递增的密度梯度！生物样品中不同组分物质在离心过程中沉降或上浮以寻找与自身密度相同的溶液密度梯度区带，不同的物质最终到达相应的区带，从而实现分离！

　　沉降系数定义为沉降速度与离心力的比率或单位离心场中颗粒的沉降速度，它以svedberg单位计算，1S=1×10-13s.例如，核糖核酸酶A的沉降系数为1．85×10-13s，即可记作1．85S！近年来，在生物化学、分子生物学及生物工程等书刊文献中，对于某些大分子化合物，当它们的详细结构和分子量不很清楚时，常常用沉降系数这个概念去描述它们的大小!如核糖体RNA(rRNA)有30s亚基和50s亚基，这里的s就是沉降系数，现在多地用于生物大分子的分类，特别是核酸。

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　　这种方法非常类似于电泳中的PH梯度等电聚焦方法，在离心时，颗粒依其密度的不同沉降或向上漂浮，直到移动到与自身的密度相同的溶剂梯度中为止，其结果是依样品物质密度的不同在梯度溶剂中形成一个个区带。在实验方法上可以采用预先制备密度梯度溶液的方法，一般先制备两种储备液，它们的浓度决定zui终所形成梯度溶液的极限!可以通过分步减小密度，从离心管底部到上部逐渐加液的方式形成不连续梯度溶液，也可以通过一个梯度混合器产生连续梯度密度！

　　离心力溶液中的固相颗粒做圆周运动时产生一个向外离心力，其定义为：F=mω2r式中：F为离心力的强度；m为沉降颗粒的有效质量；ω为离心转子转动的角速度，其单位为rad/s；r为离心半径(cm)，即转子中心轴到沉降颗粒之间的距离！很显然，离心力随着转速和颗粒质量的提高而加大，而随着离心半径的减小而降低!离心力通常以相对离心力Fcf表示，即离心力F的大小相对于地球引力(G)的多少倍，单位为g，其计算公式如下：Fcf=119×105(h)2r×g可以看出，在同一转速下，由于f的不同，Fcf相差会很大，实际应用时一般取平均值。

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　　摩擦力的大小与颗粒的运动速度成正比，并且受颗粒的大小、形状及介质性质的影响：式中：f为颗粒在济剂中的摩擦系数．与颗粒的大小、形状及介质性质相关；v为颗粒的沉降速度!由于离心力的存在，颗粒将加速运动直到摩擦力与离心力相等.在这种情况下，颗粒所受到的净作用力为零，颗粒将以最大速度运动。式中Mp和Ms分别为颗粒的质量及等体积的溶剂的质量。上式中的Mp和Ms很难确定，为了建立分子大小与沉降系数之间的关系，引入了沉降系数这一新的概念！