转染效率高,适用细胞种类多,可转染质粒DNA、siRNA和小动物活体转染!ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250!25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500!5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750.75ml/2890元品牌:美国ZetaLife货号:AD6001505ml/4490元品牌:美国ZetaLife货号:AD6005005ml/14580元品牌:美国ZetaLife货号:AD60100010ml/27480元产品说明:产品名称AdvancedDNARNATransfectionReagent包装规格货号:AD60002AD600050、AD60007AD600150、AD600500、AD601000规格:5ml储存条件常温运输,4℃保存,可保存两年,拒绝反复冻融!
我司主营生化试剂领域的企业,主要以转染试剂为主要产品,公司位于深圳市宝安区新安街道宝民社区创业二路5号建设银行楼创业二路5-1,更多产品信息详情请上http://www.ampere168.com查看。深圳市安培生物科技有限公司愿与社会各界朋友共同合作、共创双赢、共创精彩明天!
溶解于Buffer的质粒转染效率会下降80%左右,甚至会转染失败.质粒必须去除内毒素,内毒素对细胞将产生很大的细胞毒性,会导致转染效率下降70%-80%左右,甚至导致转染失败(推荐使用Qiagen、TIANGEN、Omega去内毒素质粒提取试剂盒).复合物的制备过程中是绝不能用其他任何试剂对核酸或转染试剂进行稀释,只需将核酸和转染试剂两者按1:1比例直接混合,如果进行了稀释会导致转染失.转染试剂与核酸混匀后用移液器吹打10-15次,室温孵育10-15分钟后即可加入细胞培养板。
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细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液!分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达!若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达!注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!
理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点!病毒介导的转染技术,是目前转染效率较高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势!但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及!其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点.需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得较优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化.影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑。
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一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同的构建)分析结果,常常用到一些报告系统如荧光蛋白,β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染,外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体(episome)存在。
尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小,大约1/104转染细胞能整合,通常需要通过一些选择性标记,如来氨丙基转移酶(APH;新霉素抗性基因),潮霉素B磷酸转移酶(HPH),胸苷激酶(TK)等反复筛选,得到稳定转染的同源细胞系。
转染技术的选择对转染结果影响也很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。
生化试剂
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