使用说明:材料准备RNA浓度20uM/L质粒DNA浓度300ng-2ug/ul(注意:①溶解于无菌双蒸水或超纯水;②无内毒素)操作步骤提前1天接种细胞:细胞汇合度在60-80%左右,再进行转染!核酸复合物制备:将核酸与转染试剂按照1:1关系直接混合,用移液器吹吸10-15次混匀,室温静止10-15分钟.在细胞培养基中加入核酸复合物:根据参考用量在细胞中加入核酸复合物,并轻轻混匀;细胞培养基里面可以含有血清!
细胞转染简介:随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具!在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛.转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术!随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法.转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径!电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术。
转染24小时后进行正常换液,不能像Lipo2000一样转染4-6小时后换液!原代细胞、免疫细胞转染时,细胞基础培养基里面不能含有双抗培养基!转染操作示意图不同转染实验各成分推荐用量ZetaLifeAdvancedDNARNA转染试剂系列价格:品牌:美国ZetaLife货号:AD6000250!25ml/1590元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000500。5ml/2390元品牌:美国ZetaLife货号:AD6000750!
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细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液.分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达.若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选。siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达.注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer.
不会.
解脲支原体感染症状潜伏期为1-3周,典型的急性期症状与其他非淋病性生殖泌尿系统感染相似,表现为尿道刺痛,不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛,特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,量少,为浆液性或脓性,多需用力挤压尿道才见分泌物溢出,常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口,或见污秽裤裆。 解脲支原体感染的症状是可以消除的,建议服用中药缓解!好夫妻同治,避免交叉感...
解脲支原体感染症状潜伏期为1-3周,典型的急性期症状与其他非淋病性生殖泌尿系统感染相似,表现为尿道刺痛,不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛,特别是当尿液较为浓缩的时候明显。尿道口轻度红肿,分泌物稀薄,量少,为浆液性或脓性,多需用力挤压尿道才见分泌物溢出,常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口,或见污秽裤裆。 解脲支原体感染的症状是可以消除的,建议服用中药缓解!好夫妻同治,避免交叉感染,男性服用利尿消炎药.丸,女性服用妇炎.丸,一般三个月即可完全消除症状!
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