细胞换液:转染24小时后对细胞进行正常换液,悬浮细胞转染过程中不用换液!分析结果:质粒DNA转染48-72小时后荧光检测转染效率,48-96小时检测mRNA或蛋白表达!若进行稳定表达细胞株的筛选,则在转染后24-48小时左右加入适量的药物进行筛选.siRNA转染后9小时荧光检测转染效率,48-72小时检测mRNA或蛋白表达!注意事项:质粒DNA必须溶解于无菌双蒸水或超纯水,但不能溶解于提取试剂盒提供的Buffer!
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理想细胞转染方法,应该具有转染效率高、细胞毒性小等优点。病毒介导的转染技术,是目前转染效率较高的方法,同时具有细胞毒性很低的优势!但是,病毒转染方法的准备程序复杂,常常对细胞类型有很强的选择性,在一般实验室中很难普及!其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点!需要指出的一点,无论采用哪种转染技术,要获得较优的转染结果,可能都需要对转染条件进行优化!影响转染效率的因素很多,从细胞类型、细胞培养条件和细胞生长状态,到转染方法的操作细节,都需要考虑。
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ZetaLife转染试剂可转染极度难转染的免疫细胞、悬浮细胞,如:T细胞、NK细胞、人淋巴细胞、THP-1等;可高效率转染siRNA到任何哺乳动物细胞;用于将DNA和siRNA转染到真核细胞系和各种原代细胞中.突出表现:ZetaLife多肽小分子转染试剂的尺寸大小是传统脂质体转染试剂体积的1/10;本转染试剂是通过细胞内㖔和细胞主动吸收进入细胞;本转染试剂进入后对细胞膜无物理性损伤,不易出现细胞变形,保持高的细胞活力;不激活细胞表面或细胞体内marker;可反映真实的细胞通路蛋白原始数据;可转染免疫细胞、悬浮细胞等。
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细胞转染简介:随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具!在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越广泛.转染,是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法!转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径!电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导的技术;生物介导方法,有较为原始的原生质体转染,和现在比较多见的各种病毒介导的转染技术!
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一般来说病毒不会逆行性的传播,也就是说不会从乳汁中逆行传播给女性。
这个肯定是WIN系统下的了,除非你是计算机专业的
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