加样（样本处理区）将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心！PCR扩增（核酸扩增区）1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；2设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择：检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可！3推荐循环参数设置：结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

　　2结果判断阳性：检测通道Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；可疑：检测通道35Ct值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为35Ct值≤38，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性；阴性：样本检测结果Ct值38或无Ct值。质控标准阴性质控品：Ct38或无Ct值显示；阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效！【注意事项】所有操作严格按照说明书进行；试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；反应液应避光保存；反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理.

　　 上海晅科生物科技有限公司主营：汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)等等产品，涉及生物诊断试剂等等行业。 公司实力雄厚，重信用、守合同、保证产品质量，以多品种经营特色和薄利多销的原则，赢得了广大客户的信任。 多年来致力于生物诊断试剂，拥有众多的专业人才，并通过多年以来不断的积累，在业界形成良好的口碑。 售后方面也赢得了用户的一致好评。您的满意是我们一直前进的动力。

　　【检验原理】本试剂盒对汉坦病毒基因组保守区设计特异性的引物和探针，用一步法荧光RT-PCR技术对汉坦病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断！【试剂组成】注：1）不同批号试剂不能混用!2）试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数！【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月！【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪！

　　试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；反应管数每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管.加样（样本处理区）将步骤提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀短暂离心.PCR扩增（核酸扩增区）将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可。

　　汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）【产品名称】商品名称：汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name：Hanta-virusDetectionKit(Real-TimePCRMethod)【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测病患血液、尿液及病变组织中的汉坦病毒RNA，适用于汉坦病毒感染的辅助诊断！【检验原理】本试剂盒对汉坦病毒基因组保守区设计特异性的引物和探针，用一步法荧光RT-PCR技术对汉坦病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断.

　　推荐循环参数设置：结果分析判定结果分析条件设定设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果.检测方法的局限性样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段.

　　 如果您看到这段话，说明您对我们汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)感兴趣，不要犹豫，给我们一个机会，也给自己一个机会。 拿起手机来拨打我们的电话。华等待着您的每一次致电：13671826025 让上海晅科生物科技有限公司为您服务， 我们在上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室这里等您。

汉坦病毒1型HTV-1核酸检测试剂盒荧光PCR

　　【标本采集】抽取全血5mL至EDTA-2Na抗凝管，或采集患者尿液、病变组织.【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。【使用方法】2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作.试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；反应管数每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管。