RNA提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的RNA提取试剂盒（离心柱提取法），请按照试剂盒说明书进行操作！【注意事项】所有操作严格按照说明书进行；试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；反应液应避光保存；反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

　　2结果判断阳性：检测通道Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；可疑：检测通道35Ct值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为35Ct值≤38，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性；阴性：样本检测结果Ct值38或无Ct值!质控标准阴性质控品：Ct38或无Ct值显示；阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效!【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月。

　　PCR扩增（核酸扩增区）1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；2设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择：检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，请勿选择ROX参比荧光!3推荐循环参数设置：相关产品：埃博拉病毒(EBOV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)甲型肝炎病毒(HA-V)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肠道病毒EV71型(EV-71)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)呼吸道合胞病毒A型（RSV-A）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)呼吸道合胞病毒B型（RSV-B）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒通用型(DFV-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒2型(DFV-II)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒3型(DFV-III)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)尼帕病毒(NIPAH)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)亨德拉病毒(HeV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)新疆出血热病毒(XHFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)寨卡（zika）病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）黄热病毒（YFV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）布尼亚病毒（BV）核酸检测试剂盒（荧光PCR法）登革热病毒4型(DFV-IV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)登革热病毒1型(DFV-I)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)大肠杆菌通用型(EC-U)核酸扩增检测试剂盒(PCR-荧光探针法)汉坦病毒2型（HTV-2）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)汉坦病毒1型（HTV-1）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)汉坦病毒通用型（HTV-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)诺如病毒（NV）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)呼吸道合胞病毒通用型（RSV-U）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)呼吸道合胞病毒通用型（RSV-U）/人内参核酸检测试剂盒(双重荧光PCR法)-结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。

　　其检测结果仅供参考.【检验原理】本试剂盒用一对登革热病毒通用型特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对登革热病毒通用型RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断!注：不同批号试剂不能混用。【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月。【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪.

登革热病毒2型荧光PCR检测试剂盒

　　登革热病毒通用型(DFV-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)【产品名称】商品名称：登革热病毒通用型（DFV-U）核酸检测试剂盒(荧光RT-PCR法)Name：DiagnosticKitforDengueVirusRNA(Real-TimeRT-PCRMethod)【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测的疑似感染病人的静脉血等标本中登革热病毒通用型RNA，适用于登革热病毒通用型感染的辅助诊断。

　　其检测结果仅供参考!【检验原理】本试剂盒用一对登革热病毒通用型特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光RT-PCR技术对登革热病毒通用型RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断!【试剂组成】注：不同批号试剂不能混用！RNA提取推荐采用上海烜雅生物科技有限公司生产的RNA提取试剂盒（离心柱提取法），请按照试剂盒说明书进行操作!试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；样品每满7份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：加样（样本处理区）将步骤1提取的RNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心.