- 产品名称:ELISA检测试剂盒厂家电话_小鼠白介素6ELISA检测试剂盒厂家电话_上海晅科生物科技有限公司
- 产品价格:1200.00
- 产品数量:100
- 保质/修期:6
- 保质/修期单位:月
- 更新日期:2022-04-24
10!终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)!1测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)!测定应在加终止液后15分钟以内进行!操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度!
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验.若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性!操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔!在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。
标本应避免反复冻融!小鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒组织匀浆原则1,对于样本要求保持鲜重2,称取样本中的重量不小于50mg,一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平!3,匀浆的比例选取10%,相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆.4,匀浆液选取PBS(PH=2-4,浓度为0.01mol/L)5,匀浆过程选用组织匀浆器,冰浴上匀浆。(或者进行液氮碾磨)6,离心取上清,离心转速选用5000转每分,时间是15分钟。
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保存条件是1周内实验的,2-8℃,一周以上一个月以内实验,-20℃保存,一月以上-80℃保存!2,关于样本检测问题,如果样本取样周期过程,涉及到分不同时间段来检测,那么试剂盒的批次也会出现差异,会有一定的变异系数!这个过程有2个建议,第-一,可以收集一定数量(满足一个试剂盒的量或者几个试剂盒的量)来进行一次实验!避免样本长时间保存(样本保存时间越长,蛋白降解风险越大),但缺点是会用到不同批次试剂盒,影响批间差.
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀!温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干!加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3!洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
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用纯化的小鼠白细胞介素-6(IL-6)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-6(IL-6),再与HRP标记的白细胞介素-6(IL-6)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-6(IL-6)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-6(IL-6)浓度.