PCR扩增(核酸扩增区)1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;2设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL;荧光通道选择:检测通道(ReporterDye)FAM,淬灭通道(QuencherDye)NONE,请勿选择ROX参比荧光!3推荐循环参数设置:结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节),以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果.
【产品名称】商品名称:新疆出血热病毒(XHFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name:DiagnosticKitforXinjiangHemorrhagicFeverVirusRNA(Real-TimeRT-PCRMethod)【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测的疑似感染病人的静脉血等标本中新疆出血热病毒RNA,适用于新疆出血热病毒感染的辅助诊断!其检测结果仅供参考。【检验原理】本试剂盒用一对新疆出血热病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对新疆出血热病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
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企业名称:上海烜雅生物科技有限公司新疆出血热病毒(XHFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)试剂配制(试剂准备区)根据待检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照;样品每满7份,多配制1份),每测试反应体系配制如下表:加样(样本处理区)将步骤1提取的RNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。PCR扩增(核酸扩增区)1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;2设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL;荧光通道选择:检测通道(ReporterDye)FAM,淬灭通道(QuencherDye)NONE,请勿选择ROX参比荧光。
3推荐循环参数设置:结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节),以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。2结果判断阳性:检测通道Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;可疑:检测通道35Ct值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为35Ct值≤38,且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;阴性:样本检测结果Ct值38或无Ct值.
荧光PCR检测试剂盒怎样使用
其检测结果仅供参考。【检验原理】本试剂盒用一对新疆出血热病毒特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用一步法荧光RT-PCR技术对新疆出血热病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断!新疆出血热病毒(XHFV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)【试剂组成】名称规格酶液50μL×1管XHFV反应液500ul×2管XHFV阳性质控品(20×10^7拷贝/ml)50μL×1管阴性质控品250μL×1管注:不同批号试剂不能混用!
【试剂组成】名称规格酶液50μL×1管XHFV反应液500ul×2管XHFV阳性质控品(20×10^7拷贝/ml)50μL×1管阴性质控品250μL×1管注:不同批号试剂不能混用!【储存条件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次,有效期12个月!【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、MJOpticonLightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪.
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