取上清液待检!如果样本涉及到长时间保存，需要加蛋白酶抑制剂不涉及到长时间保存的话，是不需要加这个成分的组织匀浆离心取的上清液保存如果1礼拜内，2-8摄氏度保存即可，如果超过1周一上一个月以内，-20保存，超过1个月以上-80保存!组织样本必须离心，如果没有低温离心机，只能减少离心转速，减少离心时间，3000转离心5分钟，离心高温对目的指标影响是比较大的！以下是样本的需求量植物是组织样本，固体要求的重量是大于50mg血清血浆50微升以上一个样本对大鼠小鼠液体样本需求可以适当放宽但必须大于10微升以上1，样本在保持鲜重的同时，重量不能低于50mg2，组织匀浆比例按照10%进行，相当于1g组织加9ml的匀浆液，匀浆液要求用PBS，浓度是0.

　　10。终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）！1测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度！

　　血清血浆的收集如下：1，促凝管（临床上用橘红色管头）待分层后取上清液保存2，自然凝固，取普通生化试管，自然凝固30分钟以上，然后离心取上清，离心转速为2000转每分，时间15分钟!全血收集完成后尽量分离出血红细胞，避免导致溶血对实验产生干扰其次涉及样本保存，因为不确定老师样本取样周期和实验周期到底有多长，这个过程涉及以下问题。1，如果取样周期比较久，而且每次样本不是很多，每天或者短时间都有样本出来，这个情况样本涉及到保存。

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　　用纯化的小鼠白细胞介素-6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-6（IL-6），再与HRP标记的白细胞介素-6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻-底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色.颜色的深浅和样品中的白细胞介素-6（IL-6）呈正相关！用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-6（IL-6）浓度！

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　　加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀！温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟！配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干!加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外!温育：操作同3。洗涤：操作同5!显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟!

　　第二个就是把样本全部收集好了后，再一次进行实验，用同一批次试剂盒！这个可以减少批间差，但样本不同时间取样会导致前后样本数值之间会存在一定的差异性！这个还是要根据实际取样周期和取样量来做决定!小鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒96T使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围：使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素-6（IL-6）含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素-6（IL-6）水平!

　　5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染!6．底物请避光保存!7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准!8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理.9．本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃.2．有效期：6个月在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行检测的样本，及时储存在4℃备用！对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，Z好-70℃冻存备用.