本试剂用于检测猪血清中猪乙脑病毒抗体，可用于猪乙脑病毒疫苗免疫效果评价.【原理】本试剂盒系由预包被猪乙型脑炎病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪乙型脑炎病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪乙型脑炎病毒抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪乙型脑炎病毒抗体!

　　 如果您想了解猪乙脑病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）更多信息，请致电 华:13671826025，或者您直接到我们公司总部一起交流研讨，地址：上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室，我们期待您的致电或来访。

　　取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl!混匀，置37℃反应30分钟！扣去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干！每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）!置37℃反应30分钟!洗涤，同步骤5!每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟！

　　【储存及有效期】于2～8℃避光保存，有效期为12个月！包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮！使用期限为2个月.【适用仪器】含450nm、630nm波长的酶标仪，37℃恒温设备，可调微量移液器!【样品准备】取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染!样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存!用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）!

乙型脑炎ELISA检测试剂盒

　　阴、阳性对照不用稀释！浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液！【检验方法】使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存!空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl！混匀，置37℃反应30分钟!

　　扣去孔内液体，每孔加350ul工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干！每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟.洗涤，同步骤每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值），无参比波长用空白孔调零(即所有孔吸光值减去空白孔吸光值)！【参考值】实验正常的情况下，阴性对照≤0.

　　【注意事项】实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理！终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解！洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净!用于检测的样品应保持新鲜！试验结果的判定必须以酶标仪读数为准!

　　终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解!洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。用于检测的样品应保持新鲜!试验结果的判定必须以酶标仪读数为准!不同批号试剂组分不得混用.【生产企业】企业名称：上海晅科生物科技有限公司【检验方法】使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温！