2结果判断阳性：检测通道Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线；可疑：检测通道35Ct值≤38，建议重复检测，如果检测通道仍为35Ct值≤38，且曲线有明显的增长曲线，判定为阳性，否则为阴性；阴性：样本检测结果Ct值38或无Ct值。质控标准阴性质控品：Ct38或无Ct值显示；阳性质控品：扩增曲线有明显指数生长期，且Ct值≤32；以上条件应同时满足，否则实验视为无效!检测方法的局限性样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段.

　　【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，设计一对牛副结核分枝杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对牛副结核分枝杆菌的DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。说明：不同批号的试剂盒组分不可交互使用。【储存条件及有效期】-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次，有效期12个月。【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪。

　　【产品名称】通用名称：牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name：DiagnosticKitforMycobacteriumParatubercuBovisDNA（Real-TimePCRMethod）【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中的牛副结核分歧杆菌，用于牛副结核分歧杆菌感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术，设计一对牛副结核分枝杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对牛副结核分枝杆菌的DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断.

　　2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作。试剂配制（试剂准备区）根据待检测样本总数，设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照；样品每满10份，多配制1份)，每测试反应体系配制如下表：将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中，21uL/管!加样（样本处理区）将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心!

核酸检测探针法

　　5g于研磨器中研磨，加入5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于5mL灭菌离心管中；咽拭子样品直接取100μL于5mL灭菌离心管中！2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进行操作！副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)白色念珠菌(CAN)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)金黄色葡萄球菌(SA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)艰难梭菌(TCD-A)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)艰难梭菌(TCD-B)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肺炎链球菌（SP）核酸检测试剂盒(荧光PCR法)单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)蜡样芽孢杆菌(BC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)A族链球菌(GAS)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)麻风杆菌(ML)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)空肠弯曲菌(CJ)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)幽门螺旋杆菌(HP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)乳酸杆菌(LB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)胎儿弯曲菌(CF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)结核杆菌(TB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)脑膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肺炎链球菌(SP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)双歧杆菌(BD)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)百日咳杆菌(BP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)！

　　PCR扩增（核酸扩增区）1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；2设置好通道、样品信息，反应体系设置为25μL；荧光通道选择：检测通道（ReporterDye）FAM，淬灭通道（QuencherDye）NONE，ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光，选择None即可.3推荐循环参数设置：结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果! 以21个“530”项目、4个产学研项目、1个院士工作站为依托，创业园新传感器产业集聚了大批高层次创业人才，有博士42名、硕士74名，如国际核磁共振著名专家宋无名博士、“千人计划”李延斌博士、“长江学者”暨国家杰出青年科学家基金获得者朱向阳、丁汉博士、美国杨氏科学研究院首席科学家杨涛教授等一大批专家齐聚开发区。这些领军型人才的到来，使我市新传感器产业的发展层次有了大幅提高，也为下阶段实现“百亿级园区”目标打下了坚实基础。