小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA检测试剂盒使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）含量!实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。用纯化的小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α（TNF-α），再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色.

　　TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验.若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

　　TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNF-α）呈正相关！用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度.小鼠粒细胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒小鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒小鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒小鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA试剂盒小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒小鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒小鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒小鼠苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒小鼠瘦素(LEP)ELISA试剂盒小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒小鼠巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒小鼠基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA试剂盒小鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA试剂盒小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA检测试剂盒96T使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

肿瘤坏死因子αELISA检测试剂盒

　　注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存！2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果!3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差!一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，做复孔.如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请乘以总稀释倍数（×n×5）!

　　加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外.温育：操作同洗涤：操作同5！显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟！10！终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）.1测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行.操作程序总结：计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

　　5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染.6．底物请避光保存!7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理.9．本试剂不同批号组分不得混用！保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃!2．有效期：6个月生产企业：上海晅科生物科技有限公司小鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA检测试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存.