细胞培养的关键是高品质培养基，从而维持细胞形态和性能，实现细胞体外大量扩增，细胞解冻后高活性复苏.细胞培养基即是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增值的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境！膀胱癌类器官培养基，是一种无菌液体，含有多种成分，如：氨基酸、无机物、有机物、维生素、微量矿物质、激素、生长因子等。该培养基配方设计，专利申请，提供细胞生长的液体环境，选择性地促进体外人膀胱癌类器官的生长.

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　　◉膀胱癌类器官传代解离之后的细胞加入适量的消化酶，37℃，200rpm消化（具体时间根据类器官大小和数量决定，以无肉眼可见颗粒为准）！消化完全后1500rpm离心3min，轻轻吸去上清，使用终止培养基重悬后1500rpm离心3min，加入预冷的DMEM/F12培养基进行重悬，计数，按照培养步骤操作继续培养。类器官是由干细胞驱动而以自我组装的方式构建形成的3D细胞复合体，能够模拟人体器官的结构和功能！

　　将接种好的培养板放入培养箱至少30min，待基质胶完全凝固，然后沿24孔壁每孔缓慢加入500ul预先恢复至室温的类器官培养基，3天后镜下观察类器官形成情况，粒径大于50μm即认为类器官已经形成，每5天更换一次培养基进行培养，持续观察类器官大小，镜下观察大部分类器官大小均大于50μm且大小不再增大即可收集类器官进行后续实验!◉膀胱癌类器官收集吸去培养基，每孔加入200μL基质胶解离试剂。轻轻吹打混匀，收集至15mL离心管中，37℃解离30min（具体解离时间根据实际情况决定，以无明显大块胶状物为准），解离之后1500rpm离心3min，轻轻吸去上清，待用!

　　类器官的3D培养是指将分离出的干细胞植入含多种生长因子的基质胶中，在一定体外条件下诱导培养，形成的包含不同组织来源的上皮细胞结构、能够不断自我增殖及分化、与目的器官功能相类似的3D细胞复合体！类器官根据来源可分为3种∶胚胎干细胞和多能干细胞等衍生的类器官、组织来源干细胞衍生的类器官以及肿瘤患者来源的病变干细胞衍生的类器官.研究者们根据不同组织来源的类器官制定zui适合其生长的培养体系，并将其在体外长期培养，保存了其来源患者的组织学特征及基因组特性！

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　　提前30min从4℃冰箱取出膀胱癌类器官培养基平衡至室温，提前从-20℃冰箱取出所需体积的基质胶冰上融化！◉膀胱癌类器官培养将消化好的膀胱癌细胞悬液计数，按照1-2万细胞每孔计算所需的细胞数，根据计算好的体积吸取细胞悬液加入预冷的5mL离心管中。补齐预冷的DMEM/F12至所需体积，将预冷后的细胞悬液加入等体积的基质胶中轻轻混匀（全程冰上操作），然后将细胞与基质胶的混合液按照40μL/孔接种于24孔板!

　　产品说明：膀胱癌类器官培养基（BladderCarcinomaOrganoidMedium）是一种为促进膀胱癌类器官体外形成和扩增而设计的培养基!它是一种无菌的液体混合系统，含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。该培养基的unique配方可以提供一个合适的细胞所需营养环境，选择性地促进体外人膀胱癌类器官的生长.产品优势：培养成功率高体外持续扩增保持肿瘤特征药敏结果与临床数据接近使用说明：◉实验前准备消化好的膀胱癌原代细胞悬液15mL无菌离心管、5mL离心管、24孔细胞培养板、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。