非LED灯（如卤素灯）可能会加热您的样本并对分析产生负面影响，照射时需要使用冰块对样品降温处理!样本可以在光解后冷冻保存！若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果！如需在检测之前冷冻样本，建议先进行预实验!PMA的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除PMA共价修饰的DNA；因此，在提取基因组DNA时，需使用相同体积的基因组DNA洗脱液，进行体积归一化处理.阳性对照可以使用活细胞的基因组DNA.

　　注：DNA提取步骤参考所用试剂盒的说明书!PMA的部分作用机制是通过沉淀从样品中去除PMA结合的DNA；因此，在提取基因组DNA时，各组应使用相同体积的基因组DNA洗脱液，进行体积归一化处理（死菌和活菌提取基因组DNA量不一致，因此两者浓度相差明显）。吸取10μL菌液于液体LB培养基，在细菌培养箱中培养过夜或更长时间，使细菌培养至对数生长期（OD600≈0)；注：培养基类型及培养时间根据实验调整。取活细菌两份，每份400μL，置于干净离心管中!

　　为了验证PMA在测试样本中的有效性，可对比同处理样本-/+PMA之间的Ct(dCt)变化。实验材料（自备）光源（用于PMA修饰DNA后的光解步骤）细菌基因组DNA提取试剂盒配套的qPCRMix试剂盒对应样本类型的有效qPCR引物实验步骤吸取10μL菌液于液体LB培养基，在细菌培养箱中培养过夜或更长时间，使细菌培养至对数生长期（OD600≈0)；注：培养基类型及培养时间根据实验调整。取活细菌两份，每份400μL，置于干净离心管中!

　　非LED灯（如卤素灯）可能会加热您的样本并对分析产生负面影响，照射时需要使用冰块对样品降温处理！样本可以在光解后冷冻保存。若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果。如需在检测之前冷冻样本，建议先进行预实验。PMA的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除PMA共价修饰的DNA；因此，在提取基因组DNA时，需使用相同体积的基因组DNA洗脱液，进行体积归一化处理！阳性对照可以使用活细胞的基因组DNA!

　　使用方法使用前注意事项PMA根据细胞膜通透性区分死菌和活菌!许多杀死细菌的方法，会导致细胞膜受损，因此适用于PMA检测。但有些方法，如紫外线照射，可能不会立即导致细胞膜破裂.因此，在选择PMA检测之前，需先进行文献检索和预实验确定是否适用于您选择的细菌类型和杀伤方法.PMA处理完细菌后需要进行光解，以使染料与死细胞DNA共价结合.光解操作可以使用蓝色或白色光源!一般来说，灯越亮，光解步骤的效率就越高!

染细胞叠氮溴化丙锭说明书

　　产品介绍PMA是一种高亲和性的DNA结合染料，该染料本身具有微弱的荧光，但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光！它尤其与双链DNA具有高亲和性。PMA不具有细胞膜渗透性，因此可选择性地修饰膜受损的死细胞的DNA.PMA修饰的DNA经蓝光（~464nm）光解后，PMA上的光反应性叠氮基转化为高反应性氮烯自由基，与DNA结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键，从而导致永，久性DNA修饰（图1）!

　　为了验证PMA在测试样本中的有效性，可对比同处理样本-/+PMA之间的Ct(dCt)变化！YF488-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒AnnexinV-PE/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒AnnexinV-PE/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒AnnexinV-APC偶联物AnnexinV-APC偶联物AnnexinV-PE偶联物FITC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒FITC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒FITC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF647A-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF647A-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF647A-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒APC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒APC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒APC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒AnnexinV-PE/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒PMA（叠氮溴化丙锭）,20mMinwater产品货号：XK4051产品规格：100μL产品参数外观：橙红色液体Ex(pH3)=464nm(beforephotolysis)Ex/Em(afterphotocrosslinkingtonucleicacid)=510/610nm分子式：C27H32Cl2N6分子量：515储存条件-20℃避光保存，有效期见外包装。

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