需要280nm和260nm波长处的CF值来确定抗体等生物分子的标记程度（DOL），并用于校正染料偶联物中相应荧光染料的吸收分数!在蛋白质标记的情况下，校正因子CF280用于寡核苷酸CF的标记260！如何选择正确的标签为了获得尽可能好的结果，必须考虑几个因素。首先是激发源：为了减少样品自发荧光引起的干扰优选550nm以上或者甚至600nm以上的激发波长。除了减少红色光谱区域在与活细胞一起工作时也是有利的，因为减少了损坏！

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　　因此，对荧光标记脂质的需求正在增加，尤其是甘you磷脂，它是生物膜的组成部分！ATTO-TEC提供一系列具有一个或两个脂肪酸残基（亲脂性部分）和一个磷suan酯（亲水部分）的荧光甘you磷脂！脂质被标记在亲水头基上，因此染料在成功掺入例如质膜后位于水/脂质界面处！ATTO根据您的意愿单独染色.ATTO-TEC还根据您的意愿专门提供染料和标记剂!ATTO染料的衍生物：在大多数ATTO染料中，官能偶联基团（NHS酯等）通过柔性四原子接头连接到实际染料！

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德国atto-tec荧光淬灭剂

　　标签的发射光谱应与所应用的过滤器组.反过来，滤波器组的选择必须使其能够阻挡激发光被样品散射但尽可能有效地透射荧光。例如，当使用波长为635nm的二极管激光器作为激励源时ATTO647N的滤光片组具有650nm和750nm之间的高透射率是一个非常好的选择！从该目录中的ATTO标签列表中可以看出，ATTO647N在635nm处具有高消光系数，该波长接近吸收曲线的大值，以及优异的荧光量zi产率（hfl=65%）!

　　由于生物分子和荧光染料具有碱性（-NH2）或酸性（-COOH，-SO3H）取代基，质量和电荷都取决于pH值.表中的数字基于氨基（-NH2）非质子化，酸基团（-COOH，-SO3H）去质子化，硫醇基团（-SH）呈中性.这对应于pH值几乎中性（pH6-8）的水溶液.应该注意的是，在更酸性的条件下（pH4），荧光染料ATTO565和ATTO590中额外的羧酸基团被质子化，因此质量和电荷比表中所示的要高1！

　　下表概述了一些常用的激励源和推荐的ATTO标签.如今，紧凑而强大的激光二极管正在覆盖整个可见光和近红外区域光谱的红外部分。他们进入了许多应用程序/设备非常有效的激发源和越来越多的替代经典光源。如果没有与波长完全匹配的吸收大值的标签对于激发源，应选择波长稍长的标签!这个吸光度会更小，但激发波长和荧光光谱始终与激发波长无关，具有具有更好地辨别散射激发光的优点！ATTO染料标记的磷脂生物膜如质膜、细胞内膜，还有人造脂质膜在研究和科学中都非常感兴趣.