- 产品名称:clickchemistrytools荧光叠氮化物探针_进口clickchemistrytools代谢标记试剂_上海牧荣生物科技有限公司
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- 更新日期:2023-11-01
生物正交激活的组分仅相互特异性和自发地反应,形成所需的缀合物。这种生物正交连接策略如图1所示为了使化学反应性官能团适合生物偶联,三个基本特征是非常重要的:反应性、化学选择性和生物相容性!第*个反应性显然是在高稀释条件下进行应用的先决条件,例如蛋白质-蛋白质偶联!由于蛋白质的可用性有限和/或相关的成本因素,蛋白质-蛋白质偶联通常被限制在低蛋白质浓度(例如1mg/mL)!反应性可以由生物正交反应物对的二阶速率常数来定义!
然而,SPAAC反应的反应速率本身就很低(例如0。1至0。9M–1s–1),限制了它们在相对高浓度应用中的使用(例如蛋白质-小分子偶联、细胞标记)!对于低生物分子浓度(例如5µM)的应用,逆需Diels-Alder连接对反式-环辛烯-四嗪(TCO–Tz)是一对选择。化学选择性TCO–Tz连接对具有任何其他生物正交连接对都无法比拟的超快动力学(800M–1s–1)。超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用(如蛋白质-蛋白质偶联)的理想配对.
产物形成的二阶速率常数越高,在合理的时间尺度内,在接近中性的pH下,在低反应物浓度下,在不需要使用大量过量的情况下,偶联就越有效任何一种生物分子!生物正交反应物在10µM下的二阶速率常数(M–1s–1)与随时间变化的共轭产率百分比之间的关系如图2所示。反应物的另一个重要的生物偶联特征是它们具有化学选择性.也就是说,在其他生物官能团(例如氨基(-NH2)、羧基(-COOH)和/或硫醇(-SH))的丰富环境中,彼此之间具有选择性反应性!
ClickChemistryTools一直致力于不断开发和扩展连接产品系列!我们的研究部门由多元化的科学家组成,他们致力于利用*新的研究成果来创造新型交联和标记试剂!我们的产品被用于推进国内和世界各地许多*名研究和学术机构的药物发现、治疗方法和诊断技术。我们所有的研发以及产品制造均在我们14,000平方英尺的*先进设施中进行,该设施满足或超过所有生产和安全要求!我们的专业科学家团队可以提供及时的技术支持,以满足客户的任何需求,并为*佳使用我们的产品提供具体建议.
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因此,只有一小部分化学转化适用于在环境温度下在pH中性的水性环境中对高度官能化的生物分子(如蛋白质、核酸和糖)进行生物正交连接,同时仍保持生物功能.适合特定应用的特定连接策略的选择基于不同的因素!铜催化的叠氮化物-炔烃环加成反应(CuAAC)的使用*限于铜毒性不重要的应用(例如肽或寡修饰,或细胞裂解物标记)。在这方面,菌株促进的炔烃-叠氮化物环加成反应(SPAAC)更适合生物偶联,因为不需要催化剂或额外的试剂!
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超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用(如蛋白质-蛋白质)的理想配对结合!示例应用程序使用20倍摩尔过量的四嗪-PEG5–NHS酯在BupH缓冲液(pH5)中标记五个山羊IgG样品(100µL,5mg/mL、4mg/mL、3mg/mL、2mg/mL和1mg/mL)。类似地,在BupH缓冲液(pH5)中以0mg/mL的浓度标记0.1mLHRP(500µg),使用将20倍摩尔过量的TCO–PEG4–NHS酯持续60分钟!