因此，只有一小部分化学转化适用于在环境温度下在pH中性的水性环境中对高度官能化的生物分子（如蛋白质、核酸和糖）进行生物正交连接，同时仍保持生物功能！适合特定应用的特定连接策略的选择基于不同的因素.铜催化的叠氮化物-炔烃环加成反应（CuAAC）的使用*限于铜毒性不重要的应用（例如肽或寡修饰，或细胞裂解物标记）。在这方面，菌株促进的炔烃-叠氮化物环加成反应（SPAAC）更适合生物偶联，因为不需要催化剂或额外的试剂！

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　　这一重要特征经常被忽视，然而，缺乏选择性是通过不必要和非选择性的分子内相互作用进行自共轭（同源二聚体形成）的驱动力！最后，重要的是化学反应性官能团具有生物相容性。连接反应在与生物分子相容的温和水性缓冲条件下进行是至关重要的，而不需要对生物系统具有高毒性的催化试剂（例如Cu（I））！生物正交化学官能团必须在长期水储存期间保持高度反应性但稳定，同时对高浓度的其他生物官能团保持惰性！不幸的是，只有少数化学转化符合这些严格定义的条件：反应性、选择性和生物相容性!

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　　在去除过量试剂并测定每种蛋白质浓度后，将过量3倍的HRP–TCO以5mg/mL、4mg/mL、3mg/mL、2mg/mL和1mg/mL.60分钟后，通过SDS–PAGE分析每个偶联反应的等分试样（1µL）!货号名称CAS号A133DBCO–NHSEsterCAS1353016-71-3A102DBCO–C6–NHSEsterCAS1384870-47-6A102PDBCO–PEG5–NHSEsterCAS1378531-80-61400SulfoDBCO–TFPEster1260DBCO–PEG5–TFPEsterA124DBCO–Sulfo–NHSEsterCAS1400191-52-71259DBCO–STPEster1230SulfoDBCO–Maleimide1023MethyltetrazineDBCOA105DBCO–PEG4–BiotinCAS1255942-07-4A116WSDBCO–BiotinCAS1363444-70-5A118DBCO–mPEG5kDaA119DBCO–mPEG10kDaA120DBCO–mPEG20kDaA121DBCO–mPEG30kDa1310AFDye405DBCO1274AFDye430DBCO1278AFDye488DBCO1282AFDye532DBCO1286AFDye546DBCO1290AFDye555DBCO1294AFDye568DBCO1298AFDye594DBCO1302AFDye647DBCOA127DBCOCarboxyrhodamine110A131DBCOTAMRAA140DBCOCy3A130DBCOCy51046DBCOCy51047DBCOCy71190MBTM488DBCO1174MBTM543DBCO1184MBTM594DBCOTA102Alkyne–PEG4–Acid1080PropargylAcidTA103Alkyne–PEG4–NHSEsterTA111Propargyl–NHSEster1162PCAlkyne–NHSEster产品：TCO四嗪配体的试剂DBCO试剂无铜点击化学点击化学叠氮化物/炔烃试剂含氟叠氮化物探针下一代叠氮化物探针代谢标记试剂可切割点击化学生物素探针无生物素/链霉亲和素富集试剂盒和培养基TCO四嗪配体TCO试剂四嗪选择指南四嗪试剂荧光四嗪DBCO试剂标记试剂和构建块生物素化试剂荧光试剂炔烃标记试剂和构建块生物素化试剂荧光试剂叠氮化物标记试剂和构建块生物素化试剂荧光试剂荧光叠氮化物探针34荧光吡啶叠氮化物三功能点击化学生物素探针可切割点击化学生物素探针DADPS生物素探针光可切割生物素探针Dde生物素探针双偶氮生物素探针单击化学辅助试剂代谢标记试剂富集培养基和试剂盒不可裂解的富集试剂盒可裂解的浓缩试剂盒和培养基点击功能化琼脂术语生物正交化学是指在生物系统中发现的其他丰富化学官能团存在的情况下，在不与天然生物化学过程相互作用或干扰的情况下发生的任何化学反应！

　　生物正交激活的组分仅相互特异性和自发地反应，形成所需的缀合物！这种生物正交连接策略如图1所示为了使化学反应性官能团适合生物偶联，三个基本特征是非常重要的：反应性、化学选择性和生物相容性！第*个反应性显然是在高稀释条件下进行应用的先决条件，例如蛋白质-蛋白质偶联。由于蛋白质的可用性有限和/或相关的成本因素，蛋白质-蛋白质偶联通常被限制在低蛋白质浓度（例如1mg/mL）.反应性可以由生物正交反应物对的二阶速率常数来定义。

　　超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用（如蛋白质-蛋白质）的理想配对结合.示例应用程序使用20倍摩尔过量的四嗪-PEG5–NHS酯在BupH缓冲液（pH5）中标记五个山羊IgG样品（100µL，5mg/mL、4mg/mL、3mg/mL、2mg/mL和1mg/mL）！类似地，在BupH缓冲液（pH5）中以0mg/mL的浓度标记0。1mLHRP（500µg），使用将20倍摩尔过量的TCO–PEG4–NHS酯持续60分钟.

　　示例应用程序使用20倍摩尔过量的四嗪-PEG5–NHS酯在BupH缓冲液（pH5）中标记五个山羊IgG样品（100µL，5mg/mL、4mg/mL、3mg/mL、2mg/mL和1mg/mL）!类似地，使用20倍摩尔过量的TCO–PEG4–NHS酯标记BupH缓冲液（pH5）中0mg/mL的0.1mLHRP（500µg）60分钟!在去除过量试剂并测定每种蛋白质浓度后，将过量3倍的HRP–TCO以5mg/mL、4mg/mL、3mg/mL、2mg/mL和1mg/mL的浓度添加到IgG–四嗪中。热刺一开始选择把主场移到温布利就是因为正在修建的白鹿巷球场无法满足欧冠比赛的要求。但超过85000名球迷在温布利球场看着热刺输给摩纳哥以及勒沃库森后，有多少人还会为热刺对阵莫斯科中央陆军的比赛捧场都还是个未知数。如果热刺能进入欧罗巴联赛的话，继续使用温布利球场，可能会出现球场半空的状况。并且热刺与英足总的协议是欧冠比赛在温布利球场踢，但是其中并没有包含欧罗巴联赛也必须在这里踢的条款。所以热刺换主场的请求也是可以理解的。