生物正交激活的组分仅相互特异性和自发地反应，形成所需的缀合物！这种生物正交连接策略如图1所示为了使化学反应性官能团适合生物偶联，三个基本特征是非常重要的：反应性、化学选择性和生物相容性!第*个反应性显然是在高稀释条件下进行应用的先决条件，例如蛋白质-蛋白质偶联。由于蛋白质的可用性有限和/或相关的成本因素，蛋白质-蛋白质偶联通常被限制在低蛋白质浓度（例如1mg/mL）。反应性可以由生物正交反应物对的二阶速率常数来定义!

　　因此，只有一小部分化学转化适用于在环境温度下在pH中性的水性环境中对高度官能化的生物分子（如蛋白质、核酸和糖）进行生物正交连接，同时仍保持生物功能.适合特定应用的特定连接策略的选择基于不同的因素!铜催化的叠氮化物-炔烃环加成反应（CuAAC）的使用*限于铜毒性不重要的应用（例如肽或寡修饰，或细胞裂解物标记）.在这方面，菌株促进的炔烃-叠氮化物环加成反应（SPAAC）更适合生物偶联，因为不需要催化剂或额外的试剂。

　　这一重要特征经常被忽视，然而，缺乏选择性是通过不必要和非选择性的分子内相互作用进行自共轭（同源二聚体形成）的驱动力!最后，重要的是化学反应性官能团具有生物相容性!连接反应在与生物分子相容的温和水性缓冲条件下进行是至关重要的，而不需要对生物系统具有高毒性的催化试剂（例如Cu（I））。生物正交化学官能团必须在长期水储存期间保持高度反应性但稳定，同时对高浓度的其他生物官能团保持惰性。不幸的是，只有少数化学转化符合这些严格定义的条件：反应性、选择性和生物相容性.

　　ClickChemistryTools一直致力于不断开发和扩展连接产品系列.我们的研究部门由多元化的科学家组成，他们致力于利用*新的研究成果来创造新型交联和标记试剂!我们的产品被用于推进国内和世界各地许多*名研究和学术机构的药物发现、治疗方法和诊断技术。我们所有的研发以及产品制造均在我们14,000平方英尺的*先进设施中进行，该设施满足或超过所有生产和安全要求!我们的专业科学家团队可以提供及时的技术支持，以满足客户的任何需求，并为*佳使用我们的产品提供具体建议。

　　然而，SPAAC反应的反应速率本身就很低（例如0.1至0!9M–1s–1），限制了它们在相对高浓度应用中的使用（例如蛋白质-小分子偶联、细胞标记）.对于低生物分子浓度（例如5µM）的应用，逆需Diels-Alder连接对反式-环辛烯-四嗪（TCO–Tz）是一对选择！化学选择性TCO–Tz连接对具有任何其他生物正交连接对都无法比拟的超快动力学（800M–1s–1）。超快动力学、选择性和长期水稳定性的结合使TCO–Tz成为低浓度应用（如蛋白质-蛋白质偶联）的理想配对.

　　在低生物分子浓度（例如5µM）下，SPAAC由于适度的动力学（例如0!3至3M–1s–1）而不足，并且铜催化的炔烃-叠氮化物环加成点击反应可能会危及系统的生存能力，反式-环辛烯-四嗪（TCO–Tz）是选择的反应对!这种连接化学是基于反式环辛烯和四嗪反应对之间的逆需求Diels-Alder环加成反应，形成二氢哒嗪键（图4）！化学选择性TCO–Tz连接对具有任何其他生物正交连接对都无法比拟的超快动力学（800M–1s–1）！

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