Oligo(dT)20推荐与SuperScript™III逆转录酶、ThermoScript™逆转录酶或克隆的AMV逆转录酶配合使用!SuperScript™II逆转录酶InvitrogenSuperScriptII逆转录酶是经过基因改造的MMLV逆转录酶(RT),相较于野生型MMLVRT,其RNaseH活性较低,热稳定性较高!这种酶的RNaseH结构域突变消除了在一链cDNA合成过程中RNA的降解,从而使全长cDNA产量更高.
该苯酚和异硫氰酸胍单相溶液通常可在一小时内从人、动物、植物、酵母菌、细菌和病毒来源的液体样本中分离RNA、DNA和蛋白的单独组分。TRIzolLS试剂的主要特点包括:•其配方适用于液体样本,如血清或病毒制剂•便于从单份液体样本中回收RNA、DNA和蛋白•即使是难以处理的生物液体,依旧拥有出色的裂解能力可靠地纯化多种样本中的RNATRIzolLS试剂可处理多种液体样本(样本量多达0.25mL)。TRIzolLS试剂的浓度不同于标准TRIzol试剂,可处理较大的样本!
Lipofectamine™2000转染试剂Lipofectamine™2000转染试剂是一种多功能转染试剂,研究表明其能有效转染较广泛的贴壁和悬浮细胞系。研究人员将Lipofectamine™2000试剂用于基于siRNA和shRNA的基因敲除实验以及基因表达研究!借助Lipofectamine™2000转染试剂,您将获得:•出色的多种细胞系转染效率和高的重组蛋白表达水平(参见表格)•好的siRNA和质粒DNA共转染性能•在有血清的环境中证实有效—无需在转染后更换培养基•性能可靠,适合高通量应用•建立稳定细胞系的选择用于基因表达和基因沉默的高性能转染试剂Lipofectamine™2000转染试剂可有效处理所有常见细胞系和多种难以转染的细胞系,并且可用于含或不含血清的培养基!
TRIzol™试剂TRIzol™试剂是一款全套的即用型试剂,可从多种生物样品中分离高质量总RNA或同时分离RNA、DNA和蛋白!该苯酚和异硫氰酸胍的单相溶液设计用于在一小时内从人、动物、植物、酵母或细菌来源的细胞和组织样品中分离出RNA、DNA和蛋白的单独组分.TRIzol™试剂的主要特点包括:•可从同一样品中分离RNA、DNA和蛋白•拥有出色的裂解能力,甚至可处理困难的样品类型•针对组织、细胞、血清、病毒和细菌进行优化的配方和方案从多种样品体积和来源中可靠纯化RNATRIzol™试剂可很好地处理少量组织(50–100mg)和细胞(5×106)以及大量组织(≥1g)和细胞(107),且包含用于从人、动物、植物或细菌来源的样品中进行纯化的方案.
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单位定义:一个单位的酶量可以在37°C的环境中在20分钟内催化1nmol32P-标记焦磷酸通过置换反应进入ATP!(一个单位等于约300粘末端连接单位.)单位反应条件:66mMTris-HCl(pH6),6mMMgCl2,10mMDTT,66µMATP,3µM32P-标记焦磷酸及酶,共0!1ml,在37°C反应20分钟.RNaseOUT™重组核糖核酸酶抑制剂是胰腺型核糖核酸酶(如RNaseA)的有效非竞争性抑制剂,在多种应用中用于避免RNA降解。
与标准TRIzol试剂一样,TRIzolLS试剂可通过在样本均质化期间有效抑制核糖核酸酶活性而维持所得RNA制剂的完整性!TRIzolLS试剂用法简单,因此可同时处理大量样本!整个过程不到1小时!通过TRIzolLS试剂分离的总RNA不含蛋白和DNA污染!其配方可进行多次分离TRIzolLS试剂使您可连续沉淀单份样本中的RNA、DNA和蛋白。使用TRIzolLS试剂均质化样本后,加入氯仿,使匀浆分离成透明的上层水层(含RNA)、界面和红色下层有机层(含DNA和蛋白)!
使用该系统可检测100bp至12kb的RNA靶标。起始材料量的范围为1pg–5µg总RNA.SuperScript™III逆转录酶是一款M-MLV逆转录酶,其经过基因改造以降低RNaseH活性和提高热稳定性。该酶可用于在42–55°C温度范围内合成cDNA,相对于其他逆转录酶,具有更高的特异性和cDNA得率以及更多的全长产物。因为SuperScript™IIIRT不会受到核糖体和转运RNA的显著抑制,所以其可用于从总RNA制备物合成一链cDNA的过程.