5. 样品的处理与上样
根据样品的类型和纯化分析,需要选择合适的缓冲液,为了达到良好的分析效果,上样量必须保持在较小的体积,
一般为柱床体积的1%~5%,蛋白质样品上样前应进行浓缩,使样品浓度不大于4%(样品浓度与分配系数无关),质量好核酸分离纯化柱生产商,提供,上海宸乔生物科技有限公司,上海宸乔生物科技,
但需要注意的是,较大分子量的物质,溶液粘度会随浓度增加而增大,使分子运动受限,影响流速待凝胶沉积约 5厘米左右时,打开柱子下口,质量好核酸分离纯化柱生产商,专业生产厂家,控制流速在 1ml/min
常见问题分析
一、纯化后样品纯度不高怎么办?
1. 若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较大,目标蛋白通过穿透步骤获得,质量好核酸分离纯化柱生产商,价格,通过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;
若目标蛋白和杂蛋白等电点差异较小,目标蛋白通过洗脱步骤获得,过调节起始缓冲液pH,使目标蛋白与填料之间的静电作用更强;再调节洗脱溶液的离子强度和 pH,使目标蛋白与杂蛋白逐渐分离;
选择合适的离子交换填料及粒径;
柱没有经过起始缓冲液的充分平衡;
降低洗脱流速;
调整样品溶液黏度
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