【检验原理】本试剂对炭疽杆菌特异性基因设计引物和荧光探针[2-3],用荧光PCR技术对炭疽杆菌的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断.注:1)不同批号试剂不能混用.2)试剂盒内各试剂组份足够包装规格所标示的检测次数!【储存条件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融数不超过5次,有效期12个月!【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪!
炭疽杆菌检测方法的研究现状与展望[J]!微生物学报,201[2]陈苏红,张敏丽,牟航.实时荧光定量PCR法检测炭疽杆菌[J]!解放军医学杂志,2003,28:268-270.[3]国家质量监督检验检疫总局。SN/T2358-2009国境口岸炭疽芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法[S]!北京:科学出版社,200【生产企业】企业名称:上海晅科生物科技有限公司详情请咨询销售炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节),以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果!
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【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融!【使用方法】样品处理(样本处理区)2DNA提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(离心柱提取法),请按照试剂盒说明书进行操作。试剂配制(试剂准备区)根据待检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照;样品每满10份,多配制1份)将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中,21uL/管!
加样(样本处理区)将步骤1提取的DNA、阳性质控品、阴性质控品各取4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心!PCR扩增(核酸扩增区)1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;1设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL;荧光通道选择:检测通道(ReporterDye)FAM,淬灭通道(QuencherDye)NONE,ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光,选择None即可。结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节),以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果!
【生产企业】企业名称:上海晅科生物科技有限公司【参考文献】[1]刘炬,徐俊杰,陈薇.炭疽杆菌检测方法的研究现状与展望[J]!微生物学报,201[2]陈苏红,张敏丽,牟航!实时荧光定量PCR法检测炭疽杆菌[J]!解放军医学杂志,2003,28:268-270![3]国家质量监督检验检疫总局!SN/T2358-2009国境口岸炭疽芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法[S]!北京:科学出版社,200炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)参考说明【产品名称】通用名称:炭疽杆菌(BA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name:BacillusAnthracisDetectionKit(Real-TimePCRMethod)【包装规格】50T/盒本试剂盒适用于检测皮肤水泡液、咽拭子、可疑食物等样本中的炭疽杆菌,用于炭疽杆菌感染的辅助诊断!
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本试剂盒适用于检测皮肤水泡液、咽拭子、可疑食物等样本中的炭疽杆菌,用于炭疽杆菌感染的辅助诊断!本试剂对炭疽杆菌特异性基因设计引物和荧光探针[2-3],用荧光PCR技术对炭疽杆菌的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断!【注意事项】所有操作严格按照说明书进行;试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;反应液应避光保存;反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理.