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GC-MS数据采集有机混合物样品用微量注射器由色谱仪进样口注入,经色谱柱分离后进入质谱仪离子原在离子源被电离成离子!离子经质量分析器,检测器之后即成为质谱仪信号并输入计算机!样品由色谱柱不断流入离子源,离子由离子源不断进入分析器并不断得到质谱,只要没定好分析器扫描的质量范围和扫描时间,计算机就可以采集到一个个的质谱!如果没有样品进入离子源,计算机采集到的质谱各离子强度均为0。当有样品过入离子源时,计算机就采集到具有一定离子强度的质谱!
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送样时请尽量使用冰盒(泡沫盒+干冰+冰袋),以保证运输过程中的低温条件(干冰的挥发消耗量约为3公斤/天)!在打包时先放入足量的干冰,之后用冰袋填充泡沫盒中间的空隙,为了保持冰盒中的低温环境,建议采用厚一点的泡沫盒!取样建议:纯菌株,提供平板或者15ml菌液宏基因组是指特定环境中全部微生物遗传物质的总和。宏基因组测序以特定环境中的整个微生物群落作为研究的对象,不需对微生物进行分离培养,而是提取环境微生物总DNA进行研究.
设置原则是:一般情况下均使用毛细管柱,极性样品使用极性毛细管柱,非极性样品采用非极性毛细管柱,未知样品可先用中等极性毛细管柱,试用后再调整!当然,如果有文献可以参考,就采用文献所用条件!质谱条件包括:电离电压,电子电流,扫描速度,质量范围,这些都要根据样品情况进行设定!为了保护灯绿和倍增器,在设定质谱条件时,还要设置溶剂去除时间,使溶剂峰通过离子源之后再打开灯绿和倍增器.在所有的条件确定之后,将样品用微量注射器注入进样口,同时,启动色谱与质谱,进行GC-MS分析!
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此种扫描方式是只针对选定的离子进行检测,而其它离子不被记录.它的优点:一是对离子进行选择性检测,只记录具有特征的、感兴趣的离子,不相关的,干扰离子统统被排除;二是选定离子的检测灵敏度大大提高!在正常扫描情况下,假定一秒钟扫描2~500个质量单位!那么,扫过每个质量所花的时间大约是1/500秒,也就是说,在每次扫描中,有1/500秒的时间是在接收某一质量的离子!在选择离子扫描的情况下,假定只检测5个质量的离子,同样,也用一秒,那么,扫过一个质量所花的时间大约是1/5秒!
细菌全基因组检测,是指通过基因组测序和组装获得细菌全基因组序列,并对其进行结构和功能研究的方法.依据研究目标所需精细程度的不同,我们提供了细菌扫描图和完成图两种不同的解决方案.全基因组测序的优略:1,包含微生物的全部遗传信息,相比16S除了分类信息外还有更多的基因信息。2,功能基因研究可以找到特定环境下富集的功能基因.缺点:1,相对靶基因来讲,测序深度低,冗余信息多2,成本高,计算机的要求高,数据分析难度高实验方法:检测平台:二代高通量测序平台,三代高通量测序平台目前的三大数据库:Silva(v119)、RDP、GreenGene!