◆自备耗材和仪器①冰盒;②移液器(0!5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭菌吸头;③离心机;④涡旋混匀器;⑤金属浴!◆样品处理参照《SN/T19619-2013出口食品过敏原成分检测第-19部分:实时荧光PCR方法检测大豆成分》或其他标准处理样品,制备的样本保存待用。称取约200g样品,用洁净研钵或合适的粉碎装置将样品粉碎至粉末状用以提取DNA!样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤,为防止交叉污染,应使用一次性消耗品,研钵应经160℃干烤2h,其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用1%次氯酸钠溶液浸泡!
上海晅科生物科技有限公司晅科生物科技,我们巍峨耸立于上海市奉贤区金海公路3265号14幢11545室,我们在这里等待您的到来。 也可以通过电话联系: 联系方式:13671826025 联系人:华 致电我们,有意向不到的惊喜!
按下列条件设置扩增反应:基线和阈值设定基线范围选择一般在6-15个循环,如果有强阳性样本,应根据实际情况调整基线范围!阈值线应超过空白对照扩增曲线的Z高点,且Ct值不出现任何数值!物种鉴定系列-大豆源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)请于-20℃条件下保存,有效期12个月◆产品说明物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂,可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于食品及其原料中过敏原大豆成分的检测,检出限为0!
上海晅科生物科技有限公司是一家着力于研究生物诊断试剂的公司, 经过多年的坚持不懈与努力,公司在业内也算是有属于自己的一片天。 公司多年来一直坚持为客户提供专业、快捷、周到的服务,愿与业内同仁共同致力于行业的进步。 公司主营产品有:大豆源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法),我们在这里等待您的到来!
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转基因检测试剂盒
不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。◆样品处理参照《SN/T19619-2013出口食品过敏原成分检测第-19部分:实时荧光PCR方法检测大豆成分》或其他标准处理样品,制备的样本保存待用.称取约200g样品,用洁净研钵或合适的粉碎装置将样品粉碎至粉末状用以提取DNA.样品的采集和制备是过敏原成分鉴别的重要步骤,为防止交叉污染,应使用一次性消耗品,研钵应经160℃干烤2h,其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用1%次氯酸钠溶液浸泡!
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其它防止交叉污染的措施按照GB/T27403中的规定执行.详细步骤请按照标准操作!添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板、PG-大豆源-P!盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30s,离心1min,立即进行PCR扩增反应.大豆源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)扩增反应(扩增及产物分析区)使用荧光定量PCR仪,荧光基团选择FAM,淬灭基团选择NONE!
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大豆源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)物种鉴定系列中的过敏原鉴定试剂,可针对食品中过敏原成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果!本产品用于食品及其原料中过敏原大豆成分的检测,检出限为0.01%!货号:XK-PCR-1306◆产品组成(50T/48测试)试剂含量A-大豆源-P1000μL×1支NG-P100μL×2支PG-大豆源-P100μL×1支◆适用仪器ABI7500、CFX9Mx3005P、LineGene9600等实时荧光PCR仪。
原理就是根据遗传学原理,比对父子母每个位点的等位基因。。。
RNA病毒是生物病毒的一种,属于一级。 它们的遗传物质是有核糖核酸组成(RNA ribonucleic acid),通常核酸是单链的(ssRNA single-stranded RNA),也有双链的(dsRNA double-stranded RNA)。
单链的RNA病毒根据他们的翻译意义可分为正义、负义和双向翻译的RNA病毒,正义的RNA病毒与mRNA相似,可以直接被宿主细胞翻译成蛋白质;反义RNA病毒则需要借助RNA酶的作用,以自身为模板转义出与原病毒相反义的RNA,之后再以此RNA来翻译成蛋白质。所以丙肝病毒只是有RNA加蛋白质包裹的外壳构成,是不含DNA。
与DNA病毒对比下就知道了,DNA病毒要先转录成RNA才翻译蛋白质外壳
而RNA病毒可以直接复制RNA,也可以直接翻译蛋白质外壳,但RNA经常发生变异
Roche 11745832910 DNA*地高辛标记及检测试剂盒I 中文说明书
DIG-DNA标记与检测
一、探针DNA标记方法
步骤 :
1.10ng~3ugDNA每管,双蒸水定量至总体积15ul
2.沸水水浴10分钟后迅速冰浴
3.加入 5号试剂 2ul , 6号试剂 2ul ,7号试剂 1ul
4.37度1小时~20小时
5.中止反应 加2ul 0。
2M EDTA (pH 8。0) 和/或 65度 水浴 10分钟
二、标记效率检测
(一) 试剂配置
Solution Composition Preparation
Washing buffer 0。
1 M Maleic acid, 0。15 M NaCl; pH 7。5 (20° C); 0。3% (v/v) Tween 20
Maleic acid buffer 0。1 M Maleic acid, 0。15 M NaCl; adjustwith NaOH (solid) to pH 7。
5 (20° C)
Detection buffer 0。1 M Tris-HCl, 0。1 M NaCl, pH 9。5 (20° C)
TE-buffer 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8。
0
Blocking stock solution Dissolve Blocking reagent (bottle 10) 10% (w/v) in Maleic
(10 × conc。) acid buffer underconstantly stirring on a heating block(65°C) or heat in a microwave oven,autoclave。
The solution remains opaque
Blocking solution Prepare a 1 × working solution by dilutingthe 10 × Blocking solution 1:10in Maleic acid buffer。Antibody solution Centrifuge Anti-Digoxigenin-AP(vial 8) for 5 min at 10 000 rpm in theoriginal vial prior to each use, and pipet the necessary amount carefully from thesurface。
Dilute Anti-
Digoxigenin-AP 1: 5 000 (150 mU/ml) in Blocking solution。
Colorsubstrate Add 40 _l of NBT/BCIP (vial 9) to 2 ml of Detection buffer。solution Note: Store protected from light!
(二)对照的标记DNA(4号试剂)系列稀释
(三)步骤
1、取以上制备的管2~9各1ul,以及自己标记的探针1ul,点到一小片尼龙膜
2、通过紫外线或者120度半小时使核酸交连到膜上
3、膜置塑料盒中加Maleic acid buffer 20ml ,15~25度轻摇孵育2分钟
4、10ml Blocking solution 孵育30分钟
5、10ml Antibody solution 孵育30分钟
6、10ml Washing buffer 洗2次,每次15分钟
7、10ml Detection buffer中平衡2~5分钟
8、膜在2ml新鲜配制的 Colorsubstrate solution 中避光孵育。
显色期间避免摇动
9、中止反应 用TE-buffer或者双蒸水洗5分钟
蛋白酶K预处理
三、样品检测与杂交
(一) 步骤
1、 稀释供试品及阳性对照DNA,点膜
2、 通过紫外线或者120度半小时使核酸交连到膜上
3、 将标记好的探针稀释到约25ng/ml, 煮沸5分钟后迅速冰浴
4、膜放入预热好的预杂交液(3。
5ml/100cm2)中,充分混匀,避免起泡
5、倒掉预杂交液,加入杂交液及已变性的探针。杂交温度下至少孵育6小时
四、洗膜
1、2 × SSC, 0。1% SDS , 15-25° C,洗膜2次,每次5分钟。2、0。5× SSC, 0。1% SDS ,预热至65~68° C,洗膜2次,每次5分钟
五、结果检测
(一) 试剂配制
Solution Composition Preparation
Washing buffer 0。
1 M Maleic acid, 0。15 M NaCl; pH 7。5 (20° C); 0。3% (v/v) Tween 20
Maleic acid buffer 0。1 M Maleic acid, 0。15 M NaCl; adjustwith NaOH (solid) to pH 7。
5 (20° C)
Detection buffer 0。1 M Tris-HCl, 0。1 M NaCl, pH 9。5 (20° C)
TE-buffer 10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8。
0
Blocking stock solution Dissolve Blocking reagent (bottle 10) 10% (w/v) in Maleic
(10 × conc。) acid buffer underconstantly stirring on a heating block(65°C) or heat in a microwave oven,autoclave。
The solution remains opaque
Blocking solution Prepare a 1 × working solution by dilutingthe 10 × Blocking solution1:10in Maleic acid buffer。Antibody solution Centrifuge Anti-Digoxigenin-AP(vial 8) for 5 min at 10 000 rpm in theoriginal vial prior to each use, and pipet the necessary amount carefully from thesurface。
Dilute Anti-
Digoxigenin-AP 1: 5 000 (150 mU/ml) in Blocking solution。
Colorsubstrate Add 40 _l of NBT/BCIP (vial 9) to 2 ml of Detection buffer。solution Note: Store protected from light!
(二) 步骤
1、Washing buffer洗膜1~5分钟
2、100ml Blocking solution 孵育30分钟
3、20ml Antibody solution 孵育30分钟
4、100ml Washing buffer 洗2次,每次15分钟
5、20ml Detection buffer中平衡2~5分钟
6、膜在10ml新鲜配制的 Colorsubstrate solution 中避光孵育。
显色期间摇动
7、中止反应 用TE-buffer或者双蒸水50ml洗5分钟
荧光定量PCR是这样子的 - 飘的日志 -
2010年10月10日 - 奥,荧光定量PCR原来是这样子的! 一、Real-time 。
。。real-time qPCR由于其操作简便,灵敏度高,重复性好。。。详细的这里不做介绍,我们只做简单分析。 从线性。。。
追答 : 荧光定量PCR诊断试剂盒是否需要做回收试验?如何做?
如果你们单位曾做过,请告诉我你们的经验做法
不需要做回收试验是约定俗成的,还是法规有明确要求。
如有法规,能否帮忙给出法规名称
还有我说的回收实验是专业名词。不是将产物回收
荧光定量PCR诊断试剂盒不需要做回收实验,实验做完使用仪器自带的软件对实验数据进行分析即可。反应结束后,不要打开反应管以免对环境造成污染。
应该用塑料袋包好,将其送到安全的地方处理。
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