标本应避免反复冻融。小鼠白细胞介素6(IL-6)ELISA检测试剂盒组织匀浆原则1，对于样本要求保持鲜重2，称取样本中的重量不小于50mg，一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。3，匀浆的比例选取10%，相当于1g组织加9ml的匀浆液来进行匀浆。4，匀浆液选取PBS（PH=2-4，浓度为0.01mol/L）5，匀浆过程选用组织匀浆器，冰浴上匀浆！(或者进行液氮碾磨)6，离心取上清，离心转速选用5000转每分，时间是15分钟！

小鼠白细胞介素6ELISA检测试剂盒

　　TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色！颜色的深浅和样品中的白细胞介素-6（IL-6）呈正相关!用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-6（IL-6）浓度！标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验！若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

　　标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性！操作步骤标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）!

　　血清血浆的收集如下：1，促凝管（临床上用橘红色管头）待分层后取上清液保存2，自然凝固，取普通生化试管，自然凝固30分钟以上，然后离心取上清，离心转速为2000转每分，时间15分钟！全血收集完成后尽量分离出血红细胞，避免导致溶血对实验产生干扰其次涉及样本保存，因为不确定老师样本取样周期和实验周期到底有多长，这个过程涉及以下问题.1，如果取样周期比较久，而且每次样本不是很多，每天或者短时间都有样本出来，这个情况样本涉及到保存。

　　保存条件是1周内实验的，2-8℃，一周以上一个月以内实验，-20℃保存，一月以上-80℃保存.2，关于样本检测问题，如果样本取样周期过程，涉及到分不同时间段来检测，那么试剂盒的批次也会出现差异，会有一定的变异系数。这个过程有2个建议，第-一，可以收集一定数量（满足一个试剂盒的量或者几个试剂盒的量）来进行一次实验!避免样本长时间保存（样本保存时间越长，蛋白降解风险越大），但缺点是会用到不同批次试剂盒，影响批间差!

　　用纯化的小鼠白细胞介素-6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-6（IL-6），再与HRP标记的白细胞介素-6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻-底洗涤后加底物TMB显色！TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素-6（IL-6）呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素-6（IL-6）浓度!