【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪!【标本采集】病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融.【使用方法】样品处理(样本处理区)1样本前处理组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0。
2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作!试剂配制(试剂准备区)根据待检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照;样品每满10份,多配制1份),每测试反应体系配制如下表:将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中,21uL/管。加样(样本处理区)将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。
核酸检测
5g于研磨器中研磨,加入5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于5mL灭菌离心管中;咽拭子样品直接取100μL于5mL灭菌离心管中!2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作!副溶血性弧菌(VP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)白色念珠菌(CAN)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)金黄色葡萄球菌(SA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)艰难梭菌(TCD-A)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)艰难梭菌(TCD-B)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肺炎链球菌(SP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)单增李斯特菌(LM)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)蜡样芽孢杆菌(BC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)A族链球菌(GAS)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)麻风杆菌(ML)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)空肠弯曲菌(CJ)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)幽门螺旋杆菌(HP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)乳酸杆菌(LB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)胎儿弯曲菌(CF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)结核杆菌(TB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)脑膜炎奈瑟菌通用型(NM-U)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)脑膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肺炎链球菌(SP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)双歧杆菌(BD)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)百日咳杆菌(BP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法).
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PCR扩增(核酸扩增区)1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;2设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL;荧光通道选择:检测通道(ReporterDye)FAM,淬灭通道(QuencherDye)NONE,ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光,选择None即可。3推荐循环参数设置:结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节),以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。
【标本采集】病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融.【使用方法】样品处理(样本处理区)1样本前处理组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0!5g于研磨器中研磨,加入5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于5mL灭菌离心管中;咽拭子样品直接取100μL于5mL灭菌离心管中.
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【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,设计一对牛副结核分枝杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对牛副结核分枝杆菌的DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断!说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。【储存条件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次,有效期12个月!【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪!
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上海晅科生物科技有限公司主营:牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)等等产品,涉及生物诊断试剂等等行业。 公司实力雄厚,重信用、守合同、保证产品质量,以多品种经营特色和薄利多销的原则,赢得了广大客户的信任。 多年来致力于生物诊断试剂,拥有众多的专业人才,并通过多年以来不断的积累,在业界形成良好的口碑。 售后方面也赢得了用户的一致好评。您的满意是我们一直前进的动力。
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