【注意事项】所有操作严格按照说明书进行;试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;反应液应避光保存;反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;实验完毕后用10%次氯酸或75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理!【生产企业】企业名称:上海晅科生物科技股份有限公司牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)【储存条件及有效期】-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过5次,有效期12个月.
PCR扩增(核酸扩增区)1将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内;2设置好通道、样品信息,反应体系设置为25μL;荧光通道选择:检测通道(ReporterDye)FAM,淬灭通道(QuencherDye)NONE,ABI系列仪器请勿选择ROX参比荧光,选择None即可!3推荐循环参数设置:结果分析判定1结果分析条件设定设置Baseline和Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节),以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果!
对虾传染性肌肉坏死病毒(IMNV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)传染性造血器官坏死病毒(IHNV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)鱼类神经坏死病毒(VNN)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)鳜鱼弹状病毒(SCRV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)罗非鱼湖病毒(TiLV)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)C型产气荚膜杆菌(CP-C)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)河弧菌(VF)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)铜绿假单孢菌(PA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)出血性大肠杆菌O157:H7(EHECO157)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)沙门氏菌(SPP)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)沙门氏菌SPP-sdfi核酸检测试剂盒(荧光PCR法)沙门氏菌SPP-spy核酸检测试剂盒(荧光PCR法)沙门氏菌SPP-spec核酸检测试剂盒(荧光PCR法)沙门氏菌SPP-glgc核酸检测试剂盒(荧光PCR法)鼠疫杆菌(YP-PLA)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)鼠疫杆菌(YP-PLA/CA/3A)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)志贺氏菌(SH)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)霍乱弧菌O1(VCO1)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)【产品名称】通用名称:牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name:DiagnosticKitforMycobacteriumParatubercuBovisDNA(Real-TimePCRMethod)【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中的牛副结核分歧杆菌,用于牛副结核分歧杆菌感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考!
核酸检测pcr试剂盒
【标本采集】病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融.【使用方法】样品处理(样本处理区)1样本前处理组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0。5g于研磨器中研磨,加入5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于5mL灭菌离心管中;咽拭子样品直接取100μL于5mL灭菌离心管中!
2核酸提取推荐采用上海晅科生物科技有限公司生产的核酸提取或纯化试剂(磁珠法或离心柱法)进行核酸提取,请按照试剂说明书进行操作。试剂配制(试剂准备区)根据待检测样本总数,设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照;样品每满10份,多配制1份),每测试反应体系配制如下表:将混合好的测试反应液分装到PCR反应管中,21uL/管。加样(样本处理区)将步骤1提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取4μL,分别加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心.
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2结果判断阳性:检测通道Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;可疑:检测通道35Ct值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为35Ct值≤38,且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;阴性:样本检测结果Ct值38或无Ct值!质控标准阴性质控品:Ct38或无Ct值显示;阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且Ct值≤32;以上条件应同时满足,否则实验视为无效!检测方法的局限性样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段.