【适用仪器】ABI、安捷伦MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf等系列荧光定量PCR检测仪.【标本采集】病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融!【使用方法】样品处理(样本处理区)1样本前处理组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0。
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【产品名称】通用名称:牛副结核分歧杆菌(MPB)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)Name:DiagnosticKitforMycobacteriumParatubercuBovisDNA(Real-TimePCRMethod)【包装规格】50T/盒【预期用途】本试剂盒适用于检测气管分泌物拭子、肺组织等样本中的牛副结核分歧杆菌,用于牛副结核分歧杆菌感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。【检验原理】本试剂盒采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,设计一对牛副结核分枝杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对牛副结核分枝杆菌的DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断.
2结果判断阳性:检测通道Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;可疑:检测通道35Ct值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为35Ct值≤38,且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;阴性:样本检测结果Ct值38或无Ct值。质控标准阴性质控品:Ct38或无Ct值显示;阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且Ct值≤32;以上条件应同时满足,否则实验视为无效.检测方法的局限性样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定量检测不准确的结果;本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段!
PCR核酸检测
【标本采集】病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉拭子沾取气管分泌物,放入无菌试管中【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融!【使用方法】样品处理(样本处理区)1样本前处理组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0。5g于研磨器中研磨,加入5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于5mL灭菌离心管中;咽拭子样品直接取100μL于5mL灭菌离心管中。
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