描述:CRISPR(ClusteredReqularlyInterspacedShortPalindromicRepeats),即成簇规律间隔的短回文重复序列。Cas9蛋白是一种能够降解DNA分子的核酸酶(nuclease),其中含有两个酶切活性位点,每一个位点负责切割DNA双螺旋中的一条链!CRISPR在大约40%的细菌和90%的古细菌(archaea)的基因组中均有存在,它依赖crRNA(CRISPRRNA能够与tracrRNA配对,形成双链RNA结构,这种双链RNA分子能够介导Cas9核酸内切酶对与双链RNA分子互补结合的DNA序列进行切割)和tracrRNA(trans-activatingchimericRNA,即反式激活嵌合RNA,一种非编码RNA,能够促进crRNA的形成,是Cas9蛋白发挥RNA介导的DNA切割作用必不可少的辅助因子)对外源DNA进行特异的识别,然后使用Cas9对外源DNA进行序列特异性地切割降解,从在细菌和古细菌细胞发挥了一种获得性免疫的作用!
产品简介:基因编辑Cas9酶通过在蛋白两端加了核定位信号(NLS),可使蛋白进入细胞核内进行基因组编辑!本制品为纯蛋白体系,避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰。产品应用:基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除;基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入;sgRNA剪切靶点DNA效率检测,降低体内筛选成本;体外剪切靶DNA的特异位点!操作步骤:靶基因分析:获取基因信息,并明确CDS外显子部分;sgRNA位点设计:选择待敲除位点,对sgRNA位点进行设计,并对设计的区域进行序列预测;Cas9载体构建:根据sgRNA序列,进行引物合成;Cas9载体活性检测:扩增特异性片段后进行酶切处理!
CRISPR本身是一种防御系统,用以保护细菌和古细菌细胞不受病毒的侵害!在这些生物基因组中的CRISPR位点能表达与入侵病毒基因组序列相匹配的小分子RNA。当微生物感染了这些病毒中的一种,CRISPRRNA就能通过互补序列结合病毒基因组,并表达CRISPR相关酶,也就是Cas,这些酶都是核酸酶,能切割病毒DNA,阻止病毒完成其功能.应用:Cas9/gRNA特异位点体外剪切DNA,如plasmids、genomicDNA,PCRproduct;体外检测gRNA的剪切靶点DNA的效率;Cas9蛋白结构与功能研究.
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产品明细:货号Cat#:CCN-066AB产品名称ProductName:基因编辑Cas9酶(CRISPRSpCas9Protein)产品描述Description:TheCas9Nuclease,fusedwithNLStag,wasproducedinE!coli。来源Source:E!coli溶解介质Dissolutionconditions:1*PBS,2mMDTT浓度Concentration:3mg/mL分子量MolecularCharacterization:160kDa储存条件Storage:-80℃规格Productspecifications:50µl产品特点:gao效jing准的靶基因特异性修饰CRISPR/Cas9是由单链gRNA(GuideRNA)介导的Cas9核酸酶对靶基因的DNA序列进行改造的技术,已广泛运用于体外、细胞及动物等各种基因编辑相关研究工作.
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与TALEN和ZNF技术相比,CRISPR/Cas9基因编辑技术设计及操作简便,成本较低并且可同时敲除多个基因.gao效且特异地实现基因敲除、敲入及dingdian修饰等!CRISPR文库筛选技术ji大促进基因靶点筛查研究.产品优势:效率高、脱靶率低、周期短、应用广泛、性价比gao纯化测试Purificationtest:CRISPR核酸酶系统(核酸酶和sgRNA)的简单性,使该系统具有良好的实验室应用价值!