8mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。c)对新鲜或冷冻的组织：先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中，每50-100mg组织加0。8mL预热的溶液A，用剪切式匀浆器匀浆30秒左右，然后把裂解液转移到5mL塑料离心管中!对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织（细胞中含大量正在复制的DNA），建议组织的使用量不要超过50mg。对DNALOCKER保存组织：先用纸吸去DNALOCKER液体后再剪切成小块，其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。

　　加入0.4mL预热的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠，可将1mL枪头剪掉一截再用，也可以用称量方法加0.4g。加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀！65℃水浴5-10分钟!如果室温放置，DNA产量将降低10-20%!加入0。2mL自备氯仿，振荡器上充分振荡混均30秒，此时溶液将呈乳白色.一定要确保离心管底的液体被震荡起来!12000-15000g室温离心2分钟.上清透明，中间层为白膜（蛋白层）！小心将上清液平均转移到两个新的离心管中，避免触及中间的白膜！

　　112000-15000g室温再离心半分钟！此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA！1室温放置半分钟使残留乙醇挥发！1将离心吸附柱转移到一新的5mL塑料离心管中，加入50-100uLDNA洗脱液0，室温放置离心吸附柱1-2分钟!112000-15000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用！动物DNA提取试剂盒（吸附柱法）对DNALOCKER保存组织：先用纸吸去DNALOCKER液体后再剪切成小块，其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。

　　每个管中加入5倍体积的溶液C，充分颠倒混匀!分两次上柱（即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，室温放置2分钟，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液）!加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液！10!加0。3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000-15000g室温离心半分钟，弃穿透液。

　　根据使用材料的不同进行下列操作：a)对贴壁细胞：吸尽培养液，在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解，然后把裂解液转移到5mL塑料离心管中。b)对悬浮细胞：离心收集细胞，吸尽液体，在每1-5×106悬浮细胞中加入0。8mL预热的溶液A，用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到5mL塑料离心管中!如果是fibroblasts或carcinoma细胞，0!

DNA提取试剂