- 产品名称:PMA叠氮溴化丙锭效果怎么样_染死细胞叠氮溴化丙锭怎样使用_上海晅科生物科技有限公司
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- 更新日期:2022-11-05
为了验证PMA在测试样本中的有效性,可对比同处理样本-/+PMA之间的Ct(dCt)变化!实验材料(自备)光源(用于PMA修饰DNA后的光解步骤)细菌基因组DNA提取试剂盒配套的qPCRMix试剂盒对应样本类型的有效qPCR引物实验步骤吸取10μL菌液于液体LB培养基,在细菌培养箱中培养过夜或更长时间,使细菌培养至对数生长期(OD600≈0);注:培养基类型及培养时间根据实验调整!取活细菌两份,每份400μL,置于干净离心管中.
为了验证PMA在测试样本中的有效性,可对比同处理样本-/+PMA之间的Ct(dCt)变化.YF488-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒AnnexinV-PE/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒AnnexinV-PE/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒YF488-AnnexinV/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒AnnexinV-APC偶联物AnnexinV-APC偶联物AnnexinV-PE偶联物FITC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒FITC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒FITC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF647A-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF647A-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒YF647A-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒APC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒APC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒APC-AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒AnnexinV-PE/RedNucleusⅡ细胞凋亡试剂盒PMA(叠氮溴化丙锭),20mMinwater产品货号:XK4051产品规格:100μL产品参数外观:橙红色液体Ex(pH3)=464nm(beforephotolysis)Ex/Em(afterphotocrosslinkingtonucleicacid)=510/610nm分子式:C27H32Cl2N6分子量:515储存条件-20℃避光保存,有效期见外包装!
产品介绍PMA是一种高亲和性的DNA结合染料,该染料本身具有微弱的荧光,但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。它尤其与双链DNA具有高亲和性.PMA不具有细胞膜渗透性,因此可选择性地修饰膜受损的死细胞的DNA!PMA修饰的DNA经蓝光(~464nm)光解后,PMA上的光反应性叠氮基转化为高反应性氮烯自由基,与DNA结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键,从而导致永,久性DNA修饰(图1)。
PMA叠氮溴化丙锭效果怎么样
注:DNA提取步骤参考所用试剂盒的说明书!PMA的部分作用机制是通过沉淀从样品中去除PMA结合的DNA;因此,在提取基因组DNA时,各组应使用相同体积的基因组DNA洗脱液,进行体积归一化处理(死菌和活菌提取基因组DNA量不一致,因此两者浓度相差明显)!吸取10μL菌液于液体LB培养基,在细菌培养箱中培养过夜或更长时间,使细菌培养至对数生长期(OD600≈0);注:培养基类型及培养时间根据实验调整!取活细菌两份,每份400μL,置于干净离心管中!
使用方法使用前注意事项PMA根据细胞膜通透性区分死菌和活菌。许多杀死细菌的方法,会导致细胞膜受损,因此适用于PMA检测!但有些方法,如紫外线照射,可能不会立即导致细胞膜破裂!因此,在选择PMA检测之前,需先进行文献检索和预实验确定是否适用于您选择的细菌类型和杀伤方法.PMA处理完细菌后需要进行光解,以使染料与死细胞DNA共价结合!光解操作可以使用蓝色或白色光源.一般来说,灯越亮,光解步骤的效率就越高!
该修饰过程会使DNA不溶,并使其在随后的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失,进而阻碍死细胞中目标DNA的PCR扩增!残留在溶液中未结合的PMA,在强光照射下与水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物,使羟胺不再能够共价结合DNA,从而不影响PCR扩增。这个特性使得PMA可以通过实时定量PCR(qPCR)的手段,检测多种样本类型包括:细菌、生物膜、酵母、真菌、病毒和真核细胞;与qPCR、NGS、Sanger测序和LAMP技术相结合,广泛应用在食品和水安全和环境测试中!
病毒DNA/RNA提取试剂盒_核酸提取试剂盒价格_上海晅科生物科技有限公司
非LED灯(如卤素灯)可能会加热您的样本并对分析产生负面影响,照射时需要使用冰块对样品降温处理!样本可以在光解后冷冻保存。若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果!如需在检测之前冷冻样本,建议先进行预实验!PMA的部分作用机制是通过沉淀从样本中去除PMA共价修饰的DNA;因此,在提取基因组DNA时,需使用相同体积的基因组DNA洗脱液,进行体积归一化处理.阳性对照可以使用活细胞的基因组DNA。
近日,中国移动600万台TD手机招标初评结果拉开了中国移动2011年TD终端发展的大幕,在被称作3000万台终端需求的背景下,产业链等到了TD商用以来的最大蛋糕,特别是以国产力量为主的测试仪表产业在经历了艰难的起步后,即将迎来市场甜蜜期,但是测试要求的变化和更多厂商乃至先前在TD领域“很不积极”的厂商加入,使得市场的竞争压力更大。同时,TD测试仪表产业还有缺失,并且TD-LTE试验已经展开,为了长期维持在此领域的优势,国产厂商还需要更进一步。